缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第12-14页 |
文献回顾 | 第14-23页 |
第一部分 肿瘤相关抗原CD98表达谱及预后 | 第23-37页 |
1 材料 | 第23-25页 |
1.1 研究材料 | 第23页 |
1.2 主要仪器及耗材 | 第23-25页 |
2 方法 | 第25-30页 |
2.1 免疫组织化学实验 | 第25-27页 |
2.2 实时定量PCR | 第27-29页 |
2.3 免疫荧光染色 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-36页 |
3.1 CD98在组织芯片的表达 | 第30-31页 |
3.2 临床样本的特点 | 第31-33页 |
3.3 CD98表达与CRC患者临床特征高度相关 | 第33页 |
3.4 CD98hc与CRC患者预后相关性Cox模型分析结果 | 第33-34页 |
3.5 生存曲线 | 第34-35页 |
3.6 20例CRC患者癌与癌旁组织实时定量PCR | 第35-36页 |
3.7 CRC患者癌与癌旁组织免疫荧光 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-37页 |
第二部分 CD98抗原及其人源单抗的制备和纯化 | 第37-53页 |
1 材料 | 第37-42页 |
1.1 材料 | 第37页 |
1.2 实验仪器与器材 | 第37-38页 |
1.3 试剂 | 第38-39页 |
1.4 主要缓冲液 | 第39-40页 |
1.5 抗体基因扩增的引物序列 | 第40-42页 |
2 方法 | 第42-47页 |
2.1 原核CD98制备和纯化 | 第42-44页 |
2.2 杂交瘤细胞基因鉴定 | 第44-45页 |
2.2.1 CD98单抗制备过程 | 第44页 |
2.2.2 杂交瘤细胞基因鉴定 | 第44-45页 |
2.3 CD98单克隆抗体的表达纯化 | 第45-46页 |
2.5 蛋白免疫印迹试验 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-51页 |
3.1 原核表达CD98纯度与活性 | 第47-48页 |
3.2 CD98单抗制备和抗体轻重链鉴定 | 第48-51页 |
3.2.1 CD98单抗制备 | 第48页 |
3.2.2 杂交瘤的筛选和全长H链及L链基因抗体轻重链鉴定 | 第48-51页 |
3.3 单克隆抗体鉴定纯化蛋白活性 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
第三部分 CD98单克隆抗体的鉴定与功能 | 第53-60页 |
1 材料 | 第53-54页 |
1.1 实验仪器与器材 | 第53页 |
1.2 实验试剂 | 第53页 |
1.3 其他试剂 | 第53-54页 |
2 方法 | 第54-56页 |
2.1 间接ELISA法测单克隆抗体效价及对CD98亲和力 | 第54-55页 |
2.2 免疫印迹 | 第55页 |
2.3 免疫荧光 | 第55页 |
2.4 免疫组织化学 | 第55页 |
2.5 CCK8细胞增殖抑制实验 | 第55-56页 |
2.6 数据分析 | 第56页 |
3 结果 | 第56-59页 |
3.1 ELISA测定单克隆抗体价 | 第56页 |
3.2 Western blot鉴定纯化蛋白活性 | 第56-57页 |
3.3 免疫荧光鉴定纯化蛋白活性 | 第57页 |
3.4 免疫组化鉴定纯化蛋白活性 | 第57-58页 |
3.5 抗CD98人源抗体对人肺腺癌细胞系SW480的体外增殖抑制 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-60页 |
小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-63页 |
个人简历和研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |