摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
主要缩略词 | 第14-16页 |
1 绪论 | 第16-28页 |
1.1 问题的提出及研究意义 | 第16-18页 |
1.2 国内外研究现状 | 第18-25页 |
1.2.1 骨结构、成骨细胞和破骨细胞的生物学特性 | 第18-23页 |
1.2.2 基因芯片技术在骨科研究中的应用 | 第23-24页 |
1.2.3 MGF 及其 E 肽的研究现状 | 第24-25页 |
1.3 本研究的目的和研究内容 | 第25-28页 |
1.3.1 本研究的目的 | 第25页 |
1.3.2 本研究的主要内容 | 第25-26页 |
1.3.3 本文的创新点 | 第26-28页 |
2 MGF-Ct24E 对成骨细胞生物活性的影响 | 第28-50页 |
2.1 前言 | 第28页 |
2.2 材料与方法 | 第28-36页 |
2.2.1 实验动物 | 第28页 |
2.2.2 实验试剂及主要器材设备 | 第28-30页 |
2.2.3 成骨细胞的原代培养、纯化、鉴定 | 第30-31页 |
2.2.4 细胞增殖的测定 | 第31-32页 |
2.2.5 细胞周期的测定 | 第32页 |
2.2.6 ALP 的测定 | 第32-33页 |
2.2.7 细胞胶原合成的测定 | 第33页 |
2.2.8 细胞矿化的测定 | 第33-34页 |
2.2.9 成骨细胞标志酶 mRNA 表达的测定 | 第34-36页 |
2.2.10 统计学分析 | 第36页 |
2.3 试验结果 | 第36-45页 |
2.3.1 成骨细胞的培养与鉴定结果 | 第36-39页 |
2.3.2 MGF-Ct24E 对成骨细胞增殖与周期的影响 | 第39-42页 |
2.3.3 MGF-Ct24E 对成骨细胞分化、矿化的影响 | 第42-44页 |
2.3.4 MGF-Ct24E 对成骨细胞标志酶 mRNA 表达的影响 | 第44-45页 |
2.4 讨论 | 第45-48页 |
2.4.1 MGF-Ct24E 对成骨细胞增殖与周期的影响 | 第45-46页 |
2.4.2 MGF-Ct24E 对成骨细胞分化与矿化功能的影响 | 第46-47页 |
2.4.3 MGF-Ct24E 对成骨细胞相关基因表达的影响 | 第47-48页 |
2.5 本章小结 | 第48-50页 |
3 MGF-Ct24E 对成骨细胞基因表达谱的影响及生物信息学分析 | 第50-100页 |
3.1 前言 | 第50页 |
3.2 材料与方法 | 第50-60页 |
3.2.1 实验试剂及主要器材设备 | 第50-51页 |
3.2.2 细胞培养 | 第51页 |
3.2.3 基因芯片分析 | 第51-55页 |
3.2.4 qPCR 验证差异表达基因 | 第55-56页 |
3.2.5 基因本体论(Gene Ontology, GO)分析 | 第56-60页 |
3.2.6 差异基因信号通路(Pathway)分析 | 第60页 |
3.3 结果与讨论 | 第60-97页 |
3.3.1 总 RNA 的提取 | 第60-61页 |
3.3.2 芯片扫描结果 | 第61-63页 |
3.3.3 差异表达基因筛选 | 第63-64页 |
3.3.4 qPCR 验证差异表达基因 | 第64-66页 |
3.3.5 GO 分析结果 | 第66-79页 |
3.3.6 Pathway 分析结果 | 第79-94页 |
3.3.7 MGF-Ct24E 调节骨形成的分子机制探讨 | 第94-97页 |
3.4 本章小结 | 第97-100页 |
4 MGF-Ct24E 对破骨细胞生物活性及其骨吸收功能的影响 | 第100-118页 |
4.1 前言 | 第100页 |
4.2 材料与方法 | 第100-105页 |
4.2.1 实验动物 | 第100页 |
4.2.2 实验细胞 | 第100页 |
4.2.3 实验试剂及主要器材设备 | 第100-101页 |
4.2.4 体外破骨细胞诱导培养与鉴定 | 第101-103页 |
4.2.5 破骨前体细胞生存率的测定 | 第103页 |
4.2.6 破骨前体细胞周期的测定 | 第103页 |
4.2.7 破骨细胞形成与分化测定 | 第103-104页 |
4.2.8 破骨细胞骨吸收功能的测定 | 第104页 |
4.2.9 破骨细胞标志酶 mRNA 表达的测定 | 第104-105页 |
4.2.10 统计学分析 | 第105页 |
4.3 实验结果 | 第105-114页 |
4.3.1 破骨细胞的形成与鉴定 | 第105-107页 |
4.3.2 MGF-Ct24E 对破骨细胞细胞活性与周期的影响 | 第107-109页 |
4.3.3 MGF-Ct24E 对破骨细胞形成与分化的影响 | 第109-111页 |
4.3.4 MGF-Ct24E 对破骨细胞骨吸收功能的影响 | 第111-112页 |
4.3.5 MGF-Ct24E 对破骨细胞标志酶 mRNA 表达的影响 | 第112-114页 |
4.4 讨论 | 第114-116页 |
4.4.1 破骨细胞的诱导与鉴定 | 第114页 |
4.4.2 MGF-Ct24E 对破骨细胞分化与骨吸收功能的影响 | 第114-116页 |
4.5 本章小结 | 第116-118页 |
5 MGF-Ct24E 对破骨细胞基因表达谱的影响及生物信息学分析 | 第118-150页 |
5.1 前言 | 第118页 |
5.2 材料与方法 | 第118-123页 |
5.2.1 实验试剂及主要器材设备 | 第118-119页 |
5.2.2 细胞培养 | 第119页 |
5.2.3 基因芯片分析 | 第119-123页 |
5.2.4 qPCR 验证差异表达基因 | 第123页 |
5.2.5 GO 分析 | 第123页 |
5.2.6 Pathway 分析 | 第123页 |
5.3 结果与讨论 | 第123-148页 |
5.3.1 总 RNA 的提取 | 第123-124页 |
5.3.2 芯片扫描结果 | 第124-126页 |
5.3.3 差异表达基因筛选 | 第126-127页 |
5.3.4 qPCR 验证 | 第127-128页 |
5.3.5 GO 分析结果 | 第128-141页 |
5.3.6 Pathway 分析结果 | 第141-146页 |
5.3.7 MGF-Ct24E 调节骨吸收的分子机制探讨 | 第146-148页 |
5.4 本章小结 | 第148-150页 |
6 结论与展望 | 第150-152页 |
6.1 主要结论 | 第150-151页 |
6.2 展望 | 第151-152页 |
致谢 | 第152-154页 |
参考文献 | 第154-174页 |
附录 | 第174页 |
A. 作者在攻读博士学位期间科研及发表论文情况 | 第174页 |
B. 参加的科研项目情况 | 第174页 |