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三种白腐菌的木质纤维素酶活性及相关基因的遗传变异

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第10-18页
    1.1 白腐菌的概述第10页
    1.2 三种白腐菌的物种特性第10-11页
        1.2.1 香栓菌第10-11页
        1.2.2 一色齿毛菌第11页
        1.2.3 裂褶菌第11页
    1.3 木质纤维素及木质纤维素降解相关酶第11-13页
        1.3.1 木质纤维素第11-12页
            1.3.1.1 木质素第11-12页
            1.3.1.2 纤维素第12页
            1.3.1.3 半纤维素第12页
        1.3.2 木质素降解相关酶第12-13页
            1.3.2.1 漆酶第12页
            1.3.2.2 锰过氧化物酶第12-13页
        1.3.3 纤维素降解相关酶第13页
            1.3.3.1 内切纤维素酶第13页
            1.3.3.2 外切纤维素酶第13页
            1.3.3.3 β-葡萄糖苷酶第13页
    1.4 木质纤维素降解相关酶的研究进展第13-14页
    1.5 遗传多样性的概述第14-15页
        1.5.1 遗传多样性研究中常用的分子标记第14-15页
            1.5.1.1 限制性片段长度多态性(RFLP)第14页
            1.5.1.2 随机扩增多态性DNA(RAPD)第14-15页
            1.5.1.3 扩增片段长度多态性(AFLP)第15页
            1.5.1.4 靶位区域扩增多态性(TRAP)第15页
    1.6 白腐真菌在相关工业中的应用第15-16页
        1.6.1 白腐菌在生物制浆方面的应用第15-16页
        1.6.2 白腐菌在废水处理中的应用第16页
        1.6.3 白腐菌在其他方面的应用第16页
    1.7 研究的目的及意义第16-18页
2 三种白腐菌木质纤维素降解相关酶活性的研究第18-30页
    2.1 实验材料与设备第18页
        2.1.1 实验材料第18页
        2.1.2 仪器设备第18页
    2.2 培养基及主要试剂的配制第18-19页
        2.2.1 白桦木屑-麦麸培养基第18页
        2.2.2 马铃薯-葡萄糖固体培养基(PDA)第18页
        2.2.3 马铃薯-葡萄糖液体培养基(PDB)第18页
        2.2.4 微量元素营养液第18-19页
        2.2.5 Tien&Kirk培养基第19页
        2.2.6 3,5二硝基水杨酸(DNS)第19页
    2.3 试验方法第19-21页
        2.3.1 菌种的分离与纯化第19页
        2.3.2 菌种的活化第19页
        2.3.3 菌种生长速度的测定第19页
        2.3.4 菌种生物量的测定第19-20页
        2.3.5 木质素降解相关酶活性的检测第20页
            2.3.5.1 粗酶液的制备第20页
            2.3.5.2 漆酶酶活的测定第20页
            2.3.5.3 锰过氧化物酶酶活的测定第20页
        2.3.6 纤维素降解相关酶活性的检测第20-21页
            2.3.6.1 内切纤维素酶酶活的测定第20页
            2.3.6.2 外切纤维素酶酶活的测定第20页
            2.3.6.3 β-葡萄糖苷酶酶活的测定第20-21页
        2.3.7 数据处理与统计分析第21页
    2.4 结果与分析第21-27页
        2.4.1 3种白腐菌在PDA培养基的生长速度第21-22页
        2.4.2 3种白腐菌在PDB液体培养基中生物量的变化第22-24页
        2.4.3 3种白腐菌木质素降解相关酶活性的变化第24-25页
            2.4.3.1 3种白腐菌漆酶活性第24页
            2.4.3.2 3种白腐菌锰过氧化物酶活性第24-25页
        2.4.4 3种白腐菌纤维素降解相关酶活性的变化第25-27页
            2.4.4.1 3种白腐菌内切纤维素酶活性第25-26页
            2.4.4.2 3种白腐菌外切纤维酶活性第26页
            2.4.4.3 3种白腐菌β-葡萄糖苷酶活性第26-27页
    2.5 讨论第27-29页
    2.6 本章小结第29-30页
3 3种白腐菌木质纤维素降解酶基因TRAP标记的遗传变异第30-47页
    3.1 试验材料第30页
    3.2 仪器设备第30页
    3.3 主要试剂的配制第30页
    3.4 试验方法第30-34页
        3.4.1 3种白腐菌DNA的提取第30-31页
        3.4.2 DNA的检测第31页
        3.4.3 引物的设计第31-32页
        3.4.4 PCR反应体系的优化第32-33页
        3.4.5 引物的筛选第33-34页
        3.4.6 TRAP-PCR扩增第34页
        3.4.7 数据处理与统计分析第34页
    3.5 结果与分析第34-44页
        3.5.1 DNA提取结果及浓度测定第34页
        3.5.2 TRAP-PCR反应体系单因素优化结果第34-37页
        3.5.3 TRAP引物筛选结果第37-38页
        3.5.4 TRAP标记结果与分析第38-44页
    3.6 讨论第44-45页
    3.7 本章小结第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-54页
攻读学位期间发表的学术论文第54-55页
致谢第55-56页

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