| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 前言 | 第7-13页 |
| 一、文献综述 | 第7-12页 |
| (一) 骨的发育及其影响因素 | 第7-9页 |
| (二) 成骨细胞分化过程中转录因子的研究及进展 | 第9-11页 |
| (三) Runx2 与Osterix 关系的研究展望 | 第11-12页 |
| 二、本论文的研究内容和意义 | 第12-13页 |
| 材料和方法 | 第13-23页 |
| 一、实验材料 | 第13-16页 |
| 1 细胞及其培养试剂 | 第13页 |
| 2 质粒 | 第13页 |
| 3 抗体 | 第13页 |
| 4 引物 | 第13-14页 |
| 5 试剂 | 第14-16页 |
| 6 仪器设备 | 第16页 |
| 二、实验方法 | 第16-23页 |
| 1 表达载体的准备 | 第16-17页 |
| 2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第17页 |
| 3 感受态细胞的转化及α互补筛选 | 第17页 |
| 4 转染质粒的大量制备 | 第17-18页 |
| 5 哺乳动物细胞电穿孔转染 | 第18-19页 |
| 6 RNA 提取及电泳检测 | 第19页 |
| 7 反转录（RT 反应） | 第19-20页 |
| 8 PCR | 第20-21页 |
| 9 免疫荧光检测 | 第21页 |
| 10 报告基因（荧光素酶双报告系统）检测 | 第21-23页 |
| 结果与分析 | 第23-34页 |
| 一、质粒构建 | 第23-25页 |
| 1 Osterix 启动子及其缺失系列载体的检测 | 第23-24页 |
| 2 1.1kb 启动子“TGTGGT”和“AGTGGTT”突变体的检测 | 第24页 |
| 3 叠加体的检测 | 第24-25页 |
| 二、转染效率的检测 | 第25-26页 |
| 三、Runx2 诱导非成骨细胞内 Osterix 表达的 RT-PCR 分析 | 第26-28页 |
| 四、人 Osterix 基因5’侧翼区的克隆及荧光素酶双报告系统分析 | 第28-31页 |
| 五、Runx2 结合位点的功能鉴定 | 第31-34页 |
| 1 定点突变 | 第31-32页 |
| 2 顺式元件叠加 | 第32-34页 |
| 讨论 | 第34-37页 |
| 一、主要实验技术及方法 | 第34页 |
| 二、Runx2 能在多种细胞中诱导Osterix 的表达 | 第34-35页 |
| 三、Runx2 结合位点的鉴定 | 第35-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 致谢 | 第41页 |
