摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第12-21页 |
1.1 课题来源或研究背景 | 第12页 |
1.2 研究的目的及意义 | 第12-13页 |
1.3 蓝藻概述 | 第13-17页 |
1.3.1 蓝藻概述 | 第13-14页 |
1.3.2 藻胆蛋白概述 | 第14-16页 |
1.3.3 荧光蛋白概述 | 第16页 |
1.3.4 叶绿素概述 | 第16-17页 |
1.4 研究技术 | 第17-20页 |
1.4.1 Tricine 电泳与 Tris 电泳 | 第17-18页 |
1.4.2 二维电泳与 MALDI-TOF 质谱技术 | 第18-19页 |
1.4.3 液质联用分析技术 | 第19页 |
1.4.4 金属离子分析技术 | 第19-20页 |
1.5 主要研究内容与技术路线 | 第20-21页 |
第二章 PCC.7120 样品的处理和电泳分离 | 第21-32页 |
2.1 引言 | 第21页 |
2.2 鱼腥藻 PCC.7120 蛋白粗提液的准备 | 第21-24页 |
2.2.1 超声破碎+超滤处理 | 第22-23页 |
2.2.2 冻融破碎+硫酸铵盐析+超滤处理 | 第23页 |
2.2.3 讨论 | 第23-24页 |
2.3 SDS-PAGE 电泳条带颜色及荧光扫描 | 第24-27页 |
2.3.1 SDS-PAGE 电泳分离后色素条带及荧光条带位置 | 第24-25页 |
2.3.2 电泳条件的选择 | 第25-27页 |
2.3.3 讨论 | 第27页 |
2.4 两种不同的处理方式对电泳荧光条带影响 | 第27-29页 |
2.4.1 us 样品与 ft 样品荧光条带的对比 | 第27-28页 |
2.4.2 讨论 | 第28-29页 |
2.5 荧光条带的考染与银染 | 第29-30页 |
2.5.1 样品 us-1,2,3 的考染与银染 | 第29-30页 |
2.5.2 讨论 | 第30页 |
2.6 本章讨论 | 第30-31页 |
2.7 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 不同荧光条带相互转换的初步研究 | 第32-37页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 荧光条带的编号与切胶回收 | 第32-33页 |
3.2.1 荧光条带编号: | 第32-33页 |
3.2.2 荧光条带切胶回收 | 第33页 |
3.3 P 区及 D 区胶回收样品的不同处理后电泳分析 | 第33-35页 |
3.3.1 样品的超声处理与加热处理: | 第33页 |
3.3.2 SDS-PAGE 电泳分离后荧光分析: | 第33-34页 |
3.3.3 Y 区荧光条带胶回收样品重新电泳分离比对 | 第34-35页 |
3.3.4 讨论 | 第35页 |
3.4 本章小结 | 第35-37页 |
第四章 液质联用分析与分子克隆验证实验 | 第37-48页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 液质联用分析 | 第37-42页 |
4.2.1 实验材料: | 第37页 |
4.2.2 液质联用结果 | 第37-41页 |
4.2.3 结果分析与验证序列设计 | 第41-42页 |
4.3 构建质粒,转化及原核表达 | 第42-46页 |
4.3.1 质粒构建及转化 | 第42-44页 |
4.3.2 原核表达及荧光检测 | 第44-46页 |
4.4 本章讨论 | 第46-47页 |
4.5 本章小结 | 第47-48页 |
第五章 胶回收荧光样品成分分析 | 第48-63页 |
5.1 引言 | 第48页 |
5.2 BCA 法测回收荧光样品蛋白浓度 | 第48-50页 |
5.2.1 实验目的 | 第48-49页 |
5.2.2 绘制标准曲线如图 5.1 和表 5.1 | 第49页 |
5.2.3 胶回收样品 Ya,Yb,Yab 的蛋白浓度 | 第49-50页 |
5.2.4 讨论 | 第50页 |
5.3 蛋白粗提液分步盐析样品的光谱分析 | 第50-54页 |
5.3.1 梯度浓度硫酸铵对蛋白粗提液的分步盐析 | 第51页 |
5.3.2 盐析样品的光谱分析 | 第51-53页 |
5.3.3 盐析样品的电泳分析 | 第53页 |
5.3.4 讨论 | 第53-54页 |
5.4 Zn~(2+)离子对条带荧光强度影响 | 第54-55页 |
5.4.1 Zn~(2+)处理 | 第54页 |
5.4.2 Zn~(2+)处理前后荧光扫描结果对比 | 第54-55页 |
5.4.3 讨论 | 第55页 |
5.5 金属离子成分分析(ICP-AES) | 第55-56页 |
5.5.1 样品处理 | 第55页 |
5.5.2 等离子发射光谱分析 | 第55-56页 |
5.5.3 讨论 | 第56页 |
5.6 2-D 电泳(双向电泳)分离及等电点分析 | 第56-59页 |
5.6.1 Y 区回收荧光样品进行 2-D 电泳分离 | 第57页 |
5.6.2 2-D 电泳单点质谱分析(4800 plus MALDI-TOF) | 第57-59页 |
5.6.3 讨论 | 第59页 |
5.7 游离脯氨酸含量分析 | 第59-61页 |
5.7.1 实验目的 | 第60页 |
5.7.2 绘制标准曲线 | 第60页 |
5.7.3 样品处理及脯氨酸浓度测定 | 第60-61页 |
5.7.4 讨论 | 第61页 |
5.8 本章小结 | 第61-63页 |
总结 | 第63-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录 | 第74-76页 |
作者简介 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |