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关于鱼腥藻PCC7120电泳小分子荧光条带性质及成分的探究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第12-21页
    1.1 课题来源或研究背景第12页
    1.2 研究的目的及意义第12-13页
    1.3 蓝藻概述第13-17页
        1.3.1 蓝藻概述第13-14页
        1.3.2 藻胆蛋白概述第14-16页
        1.3.3 荧光蛋白概述第16页
        1.3.4 叶绿素概述第16-17页
    1.4 研究技术第17-20页
        1.4.1 Tricine 电泳与 Tris 电泳第17-18页
        1.4.2 二维电泳与 MALDI-TOF 质谱技术第18-19页
        1.4.3 液质联用分析技术第19页
        1.4.4 金属离子分析技术第19-20页
    1.5 主要研究内容与技术路线第20-21页
第二章 PCC.7120 样品的处理和电泳分离第21-32页
    2.1 引言第21页
    2.2 鱼腥藻 PCC.7120 蛋白粗提液的准备第21-24页
        2.2.1 超声破碎+超滤处理第22-23页
        2.2.2 冻融破碎+硫酸铵盐析+超滤处理第23页
        2.2.3 讨论第23-24页
    2.3 SDS-PAGE 电泳条带颜色及荧光扫描第24-27页
        2.3.1 SDS-PAGE 电泳分离后色素条带及荧光条带位置第24-25页
        2.3.2 电泳条件的选择第25-27页
        2.3.3 讨论第27页
    2.4 两种不同的处理方式对电泳荧光条带影响第27-29页
        2.4.1 us 样品与 ft 样品荧光条带的对比第27-28页
        2.4.2 讨论第28-29页
    2.5 荧光条带的考染与银染第29-30页
        2.5.1 样品 us-1,2,3 的考染与银染第29-30页
        2.5.2 讨论第30页
    2.6 本章讨论第30-31页
    2.7 本章小结第31-32页
第三章 不同荧光条带相互转换的初步研究第32-37页
    3.1 引言第32页
    3.2 荧光条带的编号与切胶回收第32-33页
        3.2.1 荧光条带编号:第32-33页
        3.2.2 荧光条带切胶回收第33页
    3.3 P 区及 D 区胶回收样品的不同处理后电泳分析第33-35页
        3.3.1 样品的超声处理与加热处理:第33页
        3.3.2 SDS-PAGE 电泳分离后荧光分析:第33-34页
        3.3.3 Y 区荧光条带胶回收样品重新电泳分离比对第34-35页
        3.3.4 讨论第35页
    3.4 本章小结第35-37页
第四章 液质联用分析与分子克隆验证实验第37-48页
    4.1 引言第37页
    4.2 液质联用分析第37-42页
        4.2.1 实验材料:第37页
        4.2.2 液质联用结果第37-41页
        4.2.3 结果分析与验证序列设计第41-42页
    4.3 构建质粒,转化及原核表达第42-46页
        4.3.1 质粒构建及转化第42-44页
        4.3.2 原核表达及荧光检测第44-46页
    4.4 本章讨论第46-47页
    4.5 本章小结第47-48页
第五章 胶回收荧光样品成分分析第48-63页
    5.1 引言第48页
    5.2 BCA 法测回收荧光样品蛋白浓度第48-50页
        5.2.1 实验目的第48-49页
        5.2.2 绘制标准曲线如图 5.1 和表 5.1第49页
        5.2.3 胶回收样品 Ya,Yb,Yab 的蛋白浓度第49-50页
        5.2.4 讨论第50页
    5.3 蛋白粗提液分步盐析样品的光谱分析第50-54页
        5.3.1 梯度浓度硫酸铵对蛋白粗提液的分步盐析第51页
        5.3.2 盐析样品的光谱分析第51-53页
        5.3.3 盐析样品的电泳分析第53页
        5.3.4 讨论第53-54页
    5.4 Zn~(2+)离子对条带荧光强度影响第54-55页
        5.4.1 Zn~(2+)处理第54页
        5.4.2 Zn~(2+)处理前后荧光扫描结果对比第54-55页
        5.4.3 讨论第55页
    5.5 金属离子成分分析(ICP-AES)第55-56页
        5.5.1 样品处理第55页
        5.5.2 等离子发射光谱分析第55-56页
        5.5.3 讨论第56页
    5.6 2-D 电泳(双向电泳)分离及等电点分析第56-59页
        5.6.1 Y 区回收荧光样品进行 2-D 电泳分离第57页
        5.6.2 2-D 电泳单点质谱分析(4800 plus MALDI-TOF)第57-59页
        5.6.3 讨论第59页
    5.7 游离脯氨酸含量分析第59-61页
        5.7.1 实验目的第60页
        5.7.2 绘制标准曲线第60页
        5.7.3 样品处理及脯氨酸浓度测定第60-61页
        5.7.4 讨论第61页
    5.8 本章小结第61-63页
总结第63-68页
参考文献第68-74页
附录第74-76页
作者简介第76-77页
致谢第77页

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