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钙依赖蛋白激酶在香蕉枯萎病发病过程的表达分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 前言第11-21页
    1.1 钙信号与钙依赖蛋白激酶第11-16页
        1.1.1 钙依赖蛋白激酶结构特点第12-13页
        1.1.2 CDPKs调节植物的生长和发育过程第13-14页
        1.1.3 CDPK在植物逆境胁迫中的作用第14-15页
        1.1.4 CDPK参与植物免疫应答第15-16页
    1.2 香蕉的经济效益第16-17页
    1.3 香蕉枯萎病研究第17-19页
    1.4 本研究的目的和意义第19-20页
    1.5 技术路线第20-21页
2 材料与方法第21-31页
    2.1 材料、试剂与仪器第21-22页
        2.1.1 材料第21页
        2.1.2 试剂第21页
        2.1.3 仪器第21-22页
    2.2 方法第22-31页
        2.2.1 香蕉不同器官的总RNA提取第22-23页
        2.2.2 cDNA第一链的合成第23页
        2.2.3 转录组中CDPK家族成员克隆引物设计第23-25页
        2.2.4 ORF扩增PCR反应体系和反应程序第25页
        2.2.5 目的片段的回收第25-26页
        2.2.6 回收产物与pMD18-T vector连接(参照TaKaRa说明书)第26页
        2.2.7 E.coli DH5α感受态细胞的制备第26-27页
        2.2.8 连接产物转化Ecoli DH5α第27页
        2.2.9 挑选单克隆和鉴定第27页
        2.2.10 生物信息学分析第27-28页
        2.2.11 香蕉材料处理第28-29页
        2.2.12 用荧光定量PCR验证MaCDPK在mRNA水平的表达第29-31页
3 结果第31-49页
    3.1 CDPK在转录组中表达信息第31页
    3.2 转录组中CDPK家族成员克隆第31-34页
        3.2.1 MaCDPK在转录组序列信息第31-32页
        3.2.2 MaCDPK的克隆第32-34页
    3.3 9条MaCDPK生物信息学分析第34-37页
        3.3.1 MaCDPK 1-9的基本结构特征第34页
        3.3.2 MaCDPK 1-9的氨基酸结构分析第34-36页
        3.3.3 MaCDPK1-9与拟南芥CDPK家族的系统发育分析第36页
        3.3.4 MaCDPK1-9与香蕉A基因组中同源序列分析第36-37页
    3.4 MaCDPK1-9表达分析第37-49页
        3.4.1 MaCDPK1-9在巴西蕉不同器官的特异性表达第37-39页
        3.4.2 MaCDPK1-9在接种Foc TR4后的巴西蕉根系中的表达第39-40页
        3.4.3 MaCDPK1-9在接种Foc TR4后的农科1号根系中的表达第40-43页
        3.4.4 MaCDPK1-9在用水杨酸预处理后再接种Foc TR4的巴西蕉根系中的表达第43-46页
        3.4.5 EGTA和CaCl_2分别处理巴西蕉根系中MaCDPK1-9的表达第46-49页
4. 讨论第49-52页
    4.1 MaCDPK1-9基因的克隆和生物信息学分析第49页
    4.2 MaCDPK1-9在巴西蕉不同器官的表达特征第49-50页
    4.3 在巴西蕉根系接菌FocTR 4后MaCDPK1-9表达分析第50页
    4.4 在农科1号根系接菌Foc TR 4后MaCDPK1-9表达分析第50页
    4.5 MaCDPK1-9在用水杨酸预处理后接种Foc TR4的巴西蕉根系中的表达分析第50-51页
    4.6 EGTA和CaCl_2分别处理巴西蕉根系中MaCDPK1-9的表达分析第51-52页
5 结论第52-54页
    5.1 从巴西蕉中成功克隆到了9个MaCDPK基因第52页
    5.2 MaCDPK1-9具有器官特异性第52页
    5.3 MaCDPK1-9都参与巴西蕉响应Foc TR4的免疫过程第52页
    5.4 MaCDPK1-9在接种Foc TR4后的耐病品种农科1号与易感品种巴西蕉表达差异第52页
    5.5 MaCDPK1-9可能不参与依赖水杨酸的抗枯萎病途径第52-53页
    5.6 MaCDPK1-9的转录水平受钙离子浓度的影响第53-54页
参考文献第54-60页
致谢第60页

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