摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 钙信号与钙依赖蛋白激酶 | 第11-16页 |
1.1.1 钙依赖蛋白激酶结构特点 | 第12-13页 |
1.1.2 CDPKs调节植物的生长和发育过程 | 第13-14页 |
1.1.3 CDPK在植物逆境胁迫中的作用 | 第14-15页 |
1.1.4 CDPK参与植物免疫应答 | 第15-16页 |
1.2 香蕉的经济效益 | 第16-17页 |
1.3 香蕉枯萎病研究 | 第17-19页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
1.5 技术路线 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 材料、试剂与仪器 | 第21-22页 |
2.1.1 材料 | 第21页 |
2.1.2 试剂 | 第21页 |
2.1.3 仪器 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-31页 |
2.2.1 香蕉不同器官的总RNA提取 | 第22-23页 |
2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第23页 |
2.2.3 转录组中CDPK家族成员克隆引物设计 | 第23-25页 |
2.2.4 ORF扩增PCR反应体系和反应程序 | 第25页 |
2.2.5 目的片段的回收 | 第25-26页 |
2.2.6 回收产物与pMD18-T vector连接(参照TaKaRa说明书) | 第26页 |
2.2.7 E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
2.2.8 连接产物转化Ecoli DH5α | 第27页 |
2.2.9 挑选单克隆和鉴定 | 第27页 |
2.2.10 生物信息学分析 | 第27-28页 |
2.2.11 香蕉材料处理 | 第28-29页 |
2.2.12 用荧光定量PCR验证MaCDPK在mRNA水平的表达 | 第29-31页 |
3 结果 | 第31-49页 |
3.1 CDPK在转录组中表达信息 | 第31页 |
3.2 转录组中CDPK家族成员克隆 | 第31-34页 |
3.2.1 MaCDPK在转录组序列信息 | 第31-32页 |
3.2.2 MaCDPK的克隆 | 第32-34页 |
3.3 9条MaCDPK生物信息学分析 | 第34-37页 |
3.3.1 MaCDPK 1-9的基本结构特征 | 第34页 |
3.3.2 MaCDPK 1-9的氨基酸结构分析 | 第34-36页 |
3.3.3 MaCDPK1-9与拟南芥CDPK家族的系统发育分析 | 第36页 |
3.3.4 MaCDPK1-9与香蕉A基因组中同源序列分析 | 第36-37页 |
3.4 MaCDPK1-9表达分析 | 第37-49页 |
3.4.1 MaCDPK1-9在巴西蕉不同器官的特异性表达 | 第37-39页 |
3.4.2 MaCDPK1-9在接种Foc TR4后的巴西蕉根系中的表达 | 第39-40页 |
3.4.3 MaCDPK1-9在接种Foc TR4后的农科1号根系中的表达 | 第40-43页 |
3.4.4 MaCDPK1-9在用水杨酸预处理后再接种Foc TR4的巴西蕉根系中的表达 | 第43-46页 |
3.4.5 EGTA和CaCl_2分别处理巴西蕉根系中MaCDPK1-9的表达 | 第46-49页 |
4. 讨论 | 第49-52页 |
4.1 MaCDPK1-9基因的克隆和生物信息学分析 | 第49页 |
4.2 MaCDPK1-9在巴西蕉不同器官的表达特征 | 第49-50页 |
4.3 在巴西蕉根系接菌FocTR 4后MaCDPK1-9表达分析 | 第50页 |
4.4 在农科1号根系接菌Foc TR 4后MaCDPK1-9表达分析 | 第50页 |
4.5 MaCDPK1-9在用水杨酸预处理后接种Foc TR4的巴西蕉根系中的表达分析 | 第50-51页 |
4.6 EGTA和CaCl_2分别处理巴西蕉根系中MaCDPK1-9的表达分析 | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-54页 |
5.1 从巴西蕉中成功克隆到了9个MaCDPK基因 | 第52页 |
5.2 MaCDPK1-9具有器官特异性 | 第52页 |
5.3 MaCDPK1-9都参与巴西蕉响应Foc TR4的免疫过程 | 第52页 |
5.4 MaCDPK1-9在接种Foc TR4后的耐病品种农科1号与易感品种巴西蕉表达差异 | 第52页 |
5.5 MaCDPK1-9可能不参与依赖水杨酸的抗枯萎病途径 | 第52-53页 |
5.6 MaCDPK1-9的转录水平受钙离子浓度的影响 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60页 |