| 主要缩略词表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 1 腺病毒相关简介 | 第15-16页 |
| 1.1 腺病毒生物学特征和流行病学特点 | 第15页 |
| 1.2 腺病毒感染临床表征 | 第15-16页 |
| 1.3 腺病毒感染治疗情况 | 第16页 |
| 2 抗体药物在感染性疾病中的应用 | 第16页 |
| 3 抗体药物的发展历程 | 第16-17页 |
| 4 噬菌体抗体库技术 | 第17-23页 |
| 4.1 机体原始抗体库的形成过程 | 第17-18页 |
| 4.2 噬菌体抗体库技术原理 | 第18页 |
| 4.3 噬菌体抗体库类型 | 第18页 |
| 4.4 噬菌体抗体库展示系统 | 第18-19页 |
| 4.5 噬菌体抗体库技术常用表达载体 | 第19-20页 |
| 4.6 噬菌体抗体库的筛选方法 | 第20页 |
| 4.7 噬菌体展示技术的应用 | 第20-23页 |
| 材料与方法 | 第23-49页 |
| 1 材料 | 第23-27页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 1.2 细胞和病毒株 | 第23页 |
| 1.3 试剂和耗材 | 第23-24页 |
| 1.4 主要仪器 | 第24-25页 |
| 1.5 PCR扩增抗体基因所用引物，引物序列参照噬菌体展示实验室手册 | 第25-27页 |
| 2 构建抗3型、7 型腺病毒的人源Fab抗体文库 | 第27-38页 |
| 2.1 标本采集和人血清抗Adv3、Adv7中和抗体滴度的测定 | 第27页 |
| 2.2 人外周血淋巴细胞的分离 | 第27页 |
| 2.3 人外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.4 cDNA的合成 | 第28-29页 |
| 2.5 PCR扩增抗体可变区基因 | 第29页 |
| 2.6 PCR扩增抗体恒定区基因 | 第29-30页 |
| 2.7 PCR产物的纯化回收 | 第30-31页 |
| 2.8 第一轮SOE- PCR | 第31-32页 |
| 2.9 第二轮SOE- PCR | 第32-33页 |
| 2.10 噬菌粒载体pComb 3XTT、pComb3XLambda质粒DNA的制备 | 第33-34页 |
| 2.11 pComb3XTT载体和PCR产物Fab酶切片段的制备 | 第34页 |
| 2.12 XLI-Blue电转感受态细胞制备及转化效率鉴定 | 第34-35页 |
| 2.13 辅助噬菌体M13KO7的制备和滴度测定 | 第35-36页 |
| 2.14 Fab（Κ）抗体库和Fab（λ）抗体库的构建、制备及滴度测定 | 第36-37页 |
| 2.15 Fab抗体库库容鉴定 | 第37-38页 |
| 3 人源抗3型、7 型腺病毒Fab噬菌体抗体库的筛选 | 第38-43页 |
| 3.1 3 型、7 型腺病毒的大量培养与纯化（抗原制备） | 第38-39页 |
| 3.2 噬菌体抗体库的4轮富集筛选 | 第39-40页 |
| 3.3 每一轮筛选后总噬菌体化学发光酶免疫法（phage CLEIA）检测 | 第40-41页 |
| 3.4 phage CLEIA初步鉴定第四轮筛选后的单克隆菌落 | 第41-42页 |
| 3.5 phage CLEIA再次鉴定初筛阳性克隆 | 第42页 |
| 3.6 phage CLEIA鉴定阳性克隆型别特异性 | 第42页 |
| 3.7 阳性克隆基因序列分析 | 第42-43页 |
| 4 真核表达载体构建和全抗体分泌及抗体功能鉴定 | 第43-49页 |
| 4.1 重轻链真核表达载体构建 | 第43-47页 |
| 4.2 抗体表达鉴定 | 第47-49页 |
| 结果 | 第49-64页 |
| 1 人血清抗Adv3、Adv7中和抗体滴度的测定 | 第49页 |
| 2 Fab抗体库的构建 | 第49-52页 |
| 2.1 Fab(Κ)和Fab(λ)基因的扩增结果 | 第49-51页 |
| 2.2 噬菌体Fab抗体库的建立 | 第51-52页 |
| 3 Fab抗体库的筛选 | 第52-57页 |
| 3.1 SDS-PAGE分析纯化的Adv3和Adv7腺病毒 | 第52-53页 |
| 3.2 辅助噬菌体滴度测定结果 | 第53页 |
| 3.3 噬菌体抗体库的富集筛选 | 第53-54页 |
| 3.4 总Phage CLEIA检测 | 第54页 |
| 3.5 单克隆Phage CLEIA | 第54-55页 |
| 3.6 阳性克隆噬菌体抗体特异性检测 | 第55-56页 |
| 3.7 人源抗Adv7 Fab抗体的序列分析 | 第56-57页 |
| 4 真核表达载体构建及抗体表达鉴定 | 第57-64页 |
| 4.1 抗体基因真核表达载体构建 | 第57-60页 |
| 4.2 IgG抗体功能鉴定 | 第60-64页 |
| 讨论 | 第64-72页 |
| 1 噬菌体展示的抗体基因类型及优点 | 第64页 |
| 2 Fab抗体库的构建方法 | 第64页 |
| 3 噬菌体抗体库展示系统的选择 | 第64-65页 |
| 4 抗体库库容量影响因素 | 第65-66页 |
| 5 抗体库多样性影响因素 | 第66-67页 |
| 6 抗体库富集效果影响因素 | 第67-68页 |
| 7 抗体亲和力检测和阳性结果判定 | 第68-69页 |
| 8 全抗体真核表达及抗体功能检测 | 第69-70页 |
| 9 抗体亲和力问题 | 第70页 |
| 10 噬菌体展示技术的局限性 | 第70页 |
| 11 研究展望和改进 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 综述 | 第79-94页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
