摘要 | 第6-9页 |
abstract | 第9-11页 |
前言 | 第12-19页 |
材料与方法 | 第19-48页 |
1. 实验材料 | 第19-20页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 动物饲料 | 第19页 |
1.3 细胞 | 第19-20页 |
2. 主要试剂 | 第20-24页 |
3. 主要耗材 | 第24-25页 |
4. 主要仪器设备 | 第25-26页 |
5. 常用溶液的配置 | 第26-31页 |
6. 实验方法 | 第31-48页 |
6.1 基础血糖检测 | 第31页 |
6.2 口服葡萄糖耐量实验(OGTT) | 第31页 |
6.3 胰岛素耐量实验(ITT) | 第31页 |
6.4 动物取材 | 第31页 |
6.5 骨骼肌组织总RNA提取 | 第31-32页 |
6.6 RNA反转录 | 第32页 |
6.7 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
6.8 细胞培养 | 第32-33页 |
6.9 长爪沙鼠eEF1A2基因的克隆 | 第33-35页 |
6.10 蛋白印迹实验(Western Blot) | 第35-39页 |
6.11 骨骼肌组织石蜡切片免疫荧光 | 第39-40页 |
6.12 细胞免疫荧光 | 第40-41页 |
6.13 小鼠eEF1A2基因过表达的C2C12细胞构建 | 第41-44页 |
6.14 3H(氚)标记的 2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,[3H]-2DG)摄取实验 | 第44页 |
6.15 实时荧光定量 PCR(Real-time PCR) | 第44-46页 |
6.16 eEF1A2基因DNA甲基化检测 | 第46页 |
6.17 制备骨骼肌过表达eEF1A2的db/db小鼠 | 第46-47页 |
6.18 统计学处理 | 第47-48页 |
实验结果 | 第48-73页 |
1. 长爪沙鼠eEF1A2基因的克隆、同源性分析以及过表达载体的构建 | 第48-53页 |
2. 糖尿病下调骨骼肌eEF1A2表达,且不依赖于其启动子区域甲基化水平 | 第53-57页 |
3. 胰岛素上调骨骼肌eEF1A2表达,T2DM可减弱这一作用 | 第57-58页 |
4. eEF1A2促进胰岛素刺激的肌管细胞糖代谢 | 第58-66页 |
5. 胰岛素抵抗条件下,eEF1A2对肌管胰岛素敏感性的作用 | 第66-70页 |
6. 骨骼肌eEF1A2过表达加剧db/db小鼠葡萄糖不耐受 | 第70-73页 |
讨论 | 第73-78页 |
结论 | 第78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
文献综述 | 第86-93页 |
参考文献 | 第89-93页 |
附录 英文缩略词表 | 第93-96页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
个人简历 | 第99页 |