| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 MSCs的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 MSCs的生物学特性 | 第10-12页 |
| 1.1.2 MSCs的临床应用 | 第12页 |
| 1.1.3 骨髓间充质干细胞(bone marrow MSCs,BMMSCs)和脐带间充质干细胞(umbilical cord MSCs,UCMSCs) | 第12页 |
| 1.2 DNA甲基化研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 全基因组甲基化分析的方法 | 第13-15页 |
| 1.3 RNA-seq研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3.1 转录组学的主要研究方法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 RNA-Seq技术的应用 | 第16页 |
| 1.4 五指山小型猪近交系(Wuzhishan pig,WZSP)简介 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 WZSP MSCs的分离、培养与鉴定 | 第18-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 实验动物及样品采集 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂、耗材及溶液配制 | 第18-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 WZSP MSCs的原代分离、培养与鉴定 | 第20-22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-27页 |
| 2.3.1 WZSP MSCs分离、纯化及形态学观察 | 第22-23页 |
| 2.3.2 猪UCMSCs和BMMSCs的鉴定 | 第23-25页 |
| 2.3.3 猪UCMSCs和BMMSCs的成骨成脂分化 | 第25-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 WZSP MSCs的全基因组甲基化、转录组测序及其联合分析 | 第29-60页 |
| 3.1 试验材料 | 第29页 |
| 3.1.1 实验动物及样品采集 | 第29页 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 | 第29页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-38页 |
| 3.2.1 基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.2.2 MeDIP-seq文库构建及前期数据处理 | 第30-31页 |
| 3.2.3 总RNA的提取 | 第31页 |
| 3.2.4 RNA-seq文库构建 | 第31-32页 |
| 3.2.5 Gene Ontology和KEGG pathway分析 | 第32页 |
| 3.2.6 反转录 | 第32页 |
| 3.2.7 RT-qPCR | 第32-34页 |
| 3.2.8 Sequenom mass ARRAY(?)的甲基化验证 | 第34-38页 |
| 3.2.9 迁移能力检测 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-58页 |
| 3.3.1 BMMSCs和UCMSCs的全基因组甲基化情况 | 第38-41页 |
| 3.3.2 BMMSCs和UCMSCs的全基因组转录组情况 | 第41-42页 |
| 3.3.3 BMMSCs和UCMSCs的全基因组甲基化和转录组的联合分析 | 第42-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 全文总结 | 第60-61页 |
| 4.1 本研究的主要结论和创新点 | 第60页 |
| 4.2 本研究的不足之处和下一步的计划 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 个人简历 | 第68-70页 |
| 附录 | 第70-84页 |