缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-14页 |
Abstract | 第14-19页 |
前言 | 第20-24页 |
第一部分 RAGE通过诱导MMP-2、MMP-9表达介导Aβ损伤血脑屏障 | 第24-40页 |
实验材料与方法 | 第24-33页 |
1. 实验材料 | 第24-26页 |
1.1. 主要试剂 | 第24-25页 |
1.2. 主要仪器 | 第25页 |
1.3. 溶液配制 | 第25-26页 |
2. 实验方法 | 第26-33页 |
2.1. BMEC细胞培养与处理 | 第26-27页 |
2.1.1. BMEC细胞复苏培养 | 第26-27页 |
2.1.2. BMEC细胞处理 | 第27页 |
2.2. Aβ_(1-42)的制备 | 第27页 |
2.3. MTT测定BMEC细胞活力 | 第27-28页 |
2.4. Na-F渗漏试验评估BBB通透性 | 第28-29页 |
2.4.1. Assay Buffer | 第28页 |
2.4.2. BBB模型通透性检测 | 第28-29页 |
2.5. Western Blot免疫印迹 | 第29-30页 |
2.5.1. 细胞总蛋白提取与蛋白变性处理 | 第29页 |
2.5.2. Western Blot免疫印迹检测蛋白含量 | 第29-30页 |
2.6. RT-PCR | 第30-32页 |
2.6.1. 细胞总RNA提取 | 第30-31页 |
2.6.2. RT-PCR反应体系 | 第31-32页 |
2.6.3. 琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
2.7. 统计分析 | 第32-33页 |
实验结果 | 第33-39页 |
3.1. Aβ_(1-42)诱导BMEC细胞损伤 | 第33页 |
3.2. Aβ_(1-42)诱导BBB细胞模型通透性增加 | 第33-34页 |
3.3. Aβ_(1-42)诱导TJ蛋白水平下降 | 第34-35页 |
3.4. Aβ_(1-42)诱导RAGE表达增加 | 第35-37页 |
3.5. Aβ_(1-42)诱导MMP-2、MMP-9表达增加 | 第37-38页 |
3.6. 抑制RAGE活性阻断Aβ_(1-42)诱导TJ损伤及RAGE、MMP-2与MMP-9表达 | 第38-39页 |
小结 | 第39-40页 |
第二部分 EGb通过抑制Aβ_(1-42)-Oligo细胞毒性及RAGE表达保护血脑屏障 | 第40-51页 |
实验材料与方法 | 第40-45页 |
1. 实验材料 | 第40-42页 |
1.1. 主要试剂 | 第40页 |
1.2. 主要仪器 | 第40-41页 |
1.3. 溶液配制 | 第41-42页 |
2. 实验方法 | 第42-45页 |
2.1. BMEC细胞培养与处理 | 第42页 |
2.1.1. BMEC细胞复苏培养 | 第42页 |
2.1.2. BMEC细胞处理 | 第42页 |
2.2. Aβ_(1-42)-Oligomer的制备 | 第42页 |
2.3. EGb处理细胞 | 第42-43页 |
2.4. MTT检测BMEC细胞活力 | 第43页 |
2.5. Na-F渗漏试验检测BBB通透性 | 第43页 |
2.6. Hoechst-33258检测细胞凋亡 | 第43-44页 |
2.7. 细胞内ROS检测 | 第44页 |
2.8. Western Blot免疫印迹 | 第44页 |
2.8.1. 细胞总蛋白提取与蛋白变性处理 | 第44页 |
2.8.2. Western Blot免疫印迹检测蛋白含量 | 第44页 |
2.9. 统计分析 | 第44-45页 |
实验结果 | 第45-50页 |
3.1. EGb抑制Aβ_(1-42)-Oligo诱导BMEC细胞损伤 | 第45-46页 |
3.2. EGb抑制Aβ_(1-42)-Oligo诱导BMEC细胞凋亡 | 第46页 |
3.3. EGb抑制Aβ_(1-42)-Oligo诱导BMEC细胞内ROS生成 | 第46-47页 |
3.4. EGb抑制Aβ_(1-42)-Oligo诱导BBB细胞模型通透性增加 | 第47-48页 |
3.5. EGb抑制Aβ_(1-42)-Oligo诱导TJ蛋白水平下降 | 第48-49页 |
3.6. EGb抑制Aβ_(1-42)-Oligo诱导RAGE蛋白水平增加 | 第49-50页 |
小结 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
综述 晚期糖化终产物受体:β-淀粉样蛋白损伤血脑屏障的干预新靶点 | 第62-74页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录 | 第74-76页 |
在校期间发表论文 | 第74-75页 |
在校期间获奖情况 | 第75页 |
参与基金情况 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |