摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-40页 |
·迟缓爱德华氏菌概述 | 第17-24页 |
·生物学特性 | 第17-18页 |
·流行病特征 | 第18-20页 |
·分型 | 第20-21页 |
·检测方法 | 第21-23页 |
·全基因组信息 | 第23-24页 |
·迟缓爱德华氏菌的致病相关因子 | 第24-35页 |
·粘附和侵入 | 第25-26页 |
·与宿主细胞斗争——抵抗宿主免疫机制 | 第26-27页 |
·自我生存与繁殖——从宿主体内获取营养 | 第27-29页 |
·影响宿主的免疫反应——产生毒素 | 第29-30页 |
·分泌系统 | 第30-32页 |
·细胞内寄生特性 | 第32-33页 |
·质粒 | 第33-34页 |
·活的非可培养状态 | 第34页 |
·对毒力因子的调控 | 第34-35页 |
·细菌鞭毛研究进展 | 第35-39页 |
·鞭毛的结构 | 第35-37页 |
·鞭毛合成的调控机制 | 第37页 |
·鞭毛运动的调节 | 第37页 |
·鞭毛的致病作用 | 第37-38页 |
·迟缓爱德华氏菌鞭毛蛋白研究进展 | 第38-39页 |
·本论文研究的目的和意义 | 第39-40页 |
第二章 不同来源迟缓爱德华氏菌的多样性研究 | 第40-65页 |
摘要 | 第40页 |
引言 | 第40页 |
·实验材料 | 第40-43页 |
·细菌及质粒 | 第40-41页 |
·培养基及培养方法 | 第41-42页 |
·试剂 | 第42页 |
·仪器 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-49页 |
·鞭毛染色 | 第43页 |
·细菌运动性检测 | 第43页 |
·生物膜检测 | 第43-44页 |
·fliC 基因的克隆及序列分析 | 第44-47页 |
·胞外产物(ECP)的检测及N-末端测序 | 第47-48页 |
·质粒的提取及酶切分析 | 第48-49页 |
·细菌药敏实验 | 第49页 |
·实验结果 | 第49-61页 |
·鞭毛着生情况 | 第49-52页 |
·运动性检测 | 第52-53页 |
·Edw. tarda 生物膜形成能力 | 第53-55页 |
·fliC 基因克隆分析 | 第55-58页 |
·迟缓爱德华氏菌的ECP 检测及N-末端测序 | 第58页 |
·迟缓爱德华氏菌野生大质粒的提取 | 第58-60页 |
·药敏实验 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-64页 |
·鞭毛形成与运动性、生物膜形成的相关性 | 第61-62页 |
·ECP 的致病相关特征 | 第62-63页 |
·质粒与抗药性 | 第63页 |
·鞭毛蛋白基因 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第三章 迟缓爱德华氏菌鞭毛蛋白基因fliC1 的功能研究 | 第65-91页 |
摘要 | 第65页 |
引言 | 第65-66页 |
·实验材料 | 第66-68页 |
·细菌及质粒 | 第66-67页 |
·培养基及培养方法 | 第67-68页 |
·试剂盒及工具酶 | 第68页 |
·试剂 | 第68页 |
·仪器 | 第68页 |
·实验动物 | 第68页 |
·实验方法 | 第68-76页 |
·fliC1 基因突变株的构建及筛选 | 第68-74页 |
·ΔfliC 1 突变株的互补株fliC1~+的构建 | 第74-75页 |
·生长曲线测定 | 第75页 |
·鞭毛染色 | 第75页 |
·运动性检测 | 第75-76页 |
·生物膜检测 | 第76页 |
·细菌凝集实验 | 第76页 |
·ECP 检测 | 第76页 |
·药敏实验 | 第76页 |
·致病性检测 | 第76页 |
·实验结果 | 第76-87页 |
·DfliC1 片段的构建 | 第76-77页 |
·重组自杀质粒pRE112DfliC1 的构建 | 第77页 |
·fliC1 缺陷株的筛选及验证 | 第77-78页 |
·互补株fliC1~+的构建 | 第78页 |
·生长曲线 | 第78-79页 |
·鞭毛染色 | 第79-83页 |
·运动性检测 | 第83页 |
·生物膜检测 | 第83-84页 |
·细菌凝集性检测 | 第84页 |
·ECP 检测 | 第84-85页 |
·药敏实验 | 第85-87页 |
·致病性检测 | 第87页 |
·讨论 | 第87-90页 |
·突变株ΔfliC1 的构建 | 第87页 |
·突变株ΔfliC1 鞭毛的变化 | 第87-88页 |
·突变株ΔfliC1 的生理特性 | 第88页 |
·突变株ΔfliC1 的致病相关特性 | 第88-89页 |
·突变株ΔfliC1 的致病性 | 第89-90页 |
·小结 | 第90-91页 |
第四章 迟缓爱德华氏菌鞭毛蛋白基因fliC2 的功能研究 | 第91-104页 |
摘要 | 第91页 |
引言 | 第91页 |
·实验材料 | 第91-93页 |
·细菌及质粒 | 第91-93页 |
·培养基及培养方法 | 第93页 |
·试剂和仪器 | 第93页 |
·实验动物 | 第93页 |
·实验方法 | 第93-97页 |
·fliC2 基因突变株的构建及筛选 | 第93-96页 |
·突变株ΔfliC2 的互补株fliC2~+的构建 | 第96页 |
·生长曲线测定 | 第96页 |
·鞭毛染色 | 第96页 |
·运动性检测 | 第96页 |
·生物膜检测 | 第96页 |
·ECP 检测 | 第96页 |
·自凝作用 | 第96页 |
·药敏实验 | 第96-97页 |
·致病性检测 | 第97页 |
·实验结果 | 第97-102页 |
·筛选和鉴定ΔfliC2 缺失突变株和互补株fliC2~+ | 第97页 |
·互补株fliC2~+的构建 | 第97-98页 |
·生长曲线 | 第98页 |
·鞭毛染色及运动性检测 | 第98-100页 |
·生物膜检测 | 第100页 |
·ECP 检测 | 第100-101页 |
·细菌凝集性检测 | 第101页 |
·药敏实验 | 第101-102页 |
·致病性检测 | 第102页 |
·讨论 | 第102-103页 |
·小结 | 第103-104页 |
第五章 全文结论及创新点 | 第104-107页 |
·主要结论 | 第104-105页 |
·主要创新点 | 第105页 |
·下一步工作展望 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-123页 |
附录Ⅰ 主要试剂配方 | 第123-125页 |
附录Ⅱ 博士期间发表的学术论文 | 第125-126页 |
致谢 | 第126页 |