| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-28页 |
| 1.1 类风湿性关节炎 | 第9-15页 |
| 1.1.1 类风湿性关节炎的病理、发病率及诊断标准 | 第9页 |
| 1.1.2 血清学指标 | 第9-14页 |
| 1.1.3 RF和抗CCP抗体的检测 | 第14-15页 |
| 1.2 金标免疫渗滤法 | 第15-19页 |
| 1.2.1 临床免疫学检测技术 | 第15-17页 |
| 1.2.2金标免疫渗滤法(DIGFA)在生物检测中的应用 | 第17-19页 |
| 1.3 本文研究内容 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-28页 |
| 第二章 抗CCP抗体及RF相应抗原的筛选制备 | 第28-44页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验部分 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第29页 |
| 2.2.3 CCP的ELISA检测 | 第29-30页 |
| 2.2.4 BSA-CCP偶联物的制备及测定 | 第30-31页 |
| 2.2.5 SA-biotin-CCP的免疫活性 | 第31页 |
| 2.2.6 CCP及其偶联物的临床血清检测效果 | 第31页 |
| 2.2.7 RF的ELISA检测步骤 | 第31-32页 |
| 2.2.8 RF相应抗原变性产物的制备 | 第32页 |
| 2.2.9 血清热灭活 | 第32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-42页 |
| 2.3.1 CCP的ELISA检测活性 | 第32-33页 |
| 2.3.2 BSA-CCP偶联物的制备及测定 | 第33-35页 |
| 2.3.3 SA-biotin-CCP的制备及免疫活性 | 第35-36页 |
| 2.3.4 不同序列CCP检测效果比较 | 第36-38页 |
| 2.3.5 R-IgG作为抗原检测RF | 第38-40页 |
| 2.3.6 RF检测用酶标二抗的优化 | 第40-41页 |
| 2.3.7 不同抗原包被检测RF的综合比较 | 第41-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第三章 胶体金探针的制备及优化 | 第44-55页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 实验部分 | 第44-47页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第44页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第44-45页 |
| 3.2.3 抗体与胶体金结合最佳pH测定 | 第45页 |
| 3.2.4 最小蛋白用量的确定 | 第45页 |
| 3.2.5 探针封闭洗涤大分子保护剂确定 | 第45-46页 |
| 3.2.6 金探针洗涤液最佳pH的确定 | 第46页 |
| 3.2.7 金探针洗涤液最适缓冲液的确定 | 第46页 |
| 3.2.8 金探针冻干粉的表征 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-53页 |
| 3.3.1 抗体与胶体金结合最佳pH测定 | 第47-48页 |
| 3.3.2 最小蛋白用量的确定 | 第48-49页 |
| 3.3.3 金探针封闭洗涤最适大分子稳定剂 | 第49-50页 |
| 3.3.4 金探针洗涤纯化最佳pH及缓冲溶液确定 | 第50-52页 |
| 3.3.5 金探针的表征 | 第52页 |
| 3.3.6 金探针的保存 | 第52-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第四章 金标免疫渗滤法的建立及优化 | 第55-65页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验部分 | 第55-58页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.2 实验仪器及耗材 | 第56页 |
| 4.2.3 SA-biotin-CCP及R-IgG的包被 | 第56-57页 |
| 4.2.4 最佳液体下渗速度测定 | 第57页 |
| 4.2.5 封闭条件优化 | 第57页 |
| 4.2.6 洗涤条件优化 | 第57-58页 |
| 4.2.7 吐温及PEG对检测灵敏度的影响 | 第58页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第58-63页 |
| 4.3.1 SA-biotin-CCP及R-IgG的包被 | 第58-59页 |
| 4.3.2 最佳液体渗滤速度测定 | 第59-60页 |
| 4.3.3 不同大分子物质的封闭作用 | 第60页 |
| 4.3.4 表面活性剂成分及浓度确定 | 第60-61页 |
| 4.3.5 PEG及Tween-20对检测灵敏度的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.6 抗CCP抗体及RF的金标渗滤检测效果 | 第62-63页 |
| 4.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 第五章 总结与展望 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
