中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第10-41页 |
1.1 miRNAs简述及其在肝病中的研究进展 | 第10-17页 |
1.1.1 miRNAs的生物起源与转录后调控机制 | 第10-11页 |
1.1.2 循环miRNA的稳定性 | 第11-12页 |
1.1.3 循环miRNAs与肝脏疾病 | 第12-17页 |
1.2 miRNAs传统检测技术 | 第17-23页 |
1.2.1 Northern Blot | 第18-19页 |
1.2.2 微阵列(Microarray)技术 | 第19-20页 |
1.2.3 实时荧光定量PCR简介 | 第20-23页 |
1.3 基于标记技术的miRNAs直接检测法 | 第23-27页 |
1.3.1 纳米材料标记法 | 第23-25页 |
1.3.2 荧光标记法 | 第25-26页 |
1.3.3 生物发光酶标记法 | 第26-27页 |
1.4 本课题的研究目的和意义 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-41页 |
第2章 基于磁性纳米颗粒和化学发光技术的miRNAs检测方法的建立与应用 | 第41-58页 |
2.1 前言 | 第41-42页 |
2.2 实验材料与方法 | 第42-48页 |
2.2.1 实验材料 | 第42-44页 |
2.2.2 实验方法 | 第44-48页 |
2.3 结果与讨论 | 第48-55页 |
2.3.1 实验原理 | 第48-49页 |
2.3.2 特异性实验 | 第49-50页 |
2.3.3 最佳羧基化浓度实验 | 第50-51页 |
2.3.4 最佳探针修饰浓度实验 | 第51页 |
2.3.5 最佳杂交温度Ⅰ实验 | 第51-52页 |
2.3.6 最佳杂交时间Ⅰ实验 | 第52页 |
2.3.7 最佳杂交温度Ⅱ实验 | 第52-53页 |
2.3.8 最佳杂交时间Ⅱ实验 | 第53页 |
2.3.9 检测限实验 | 第53-54页 |
2.3.10 基于磁性纳米颗粒和化学发光技术的方法检测血清样本miR-21 | 第54-55页 |
2.4 本章小结 | 第55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
第3章 基于实时荧光定量PCR技术的miRNAs检测方法的应用 | 第58-69页 |
3.1 前言 | 第58页 |
3.2 实验材料与方法 | 第58-62页 |
3.2.1 实验材料 | 第58-60页 |
3.2.2 实验方法 | 第60-62页 |
3.3 结果与讨论 | 第62-67页 |
3.3.1 实验原理 | 第62-63页 |
3.3.2 最佳退火温度实验 | 第63-64页 |
3.3.3 最佳引物浓度实验 | 第64页 |
3.3.4 基于qRT-PCR检测血清样本miR-21 | 第64-67页 |
3.4 本章小结 | 第67页 |
参考文献 | 第67-69页 |
第4章 肝癌相关miRNAs相对表达水平的化学发光检测 | 第69-80页 |
4.1 前言 | 第69-70页 |
4.2 实验材料与方法 | 第70-72页 |
4.2.1 实验材料 | 第70-71页 |
4.2.2 实验方法 | 第71-72页 |
4.3 结果与讨论 | 第72-75页 |
4.3.1 实验原理 | 第72页 |
4.3.2 miR-122最佳杂交温度Ⅰ/Ⅱ实验 | 第72-73页 |
4.3.3 miR-221最佳杂交温度Ⅰ/Ⅱ实验 | 第73页 |
4.3.4 miR-16最佳杂交温度Ⅰ/Ⅱ实验 | 第73-74页 |
4.3.5 血清样本miRNAs相对表达水平分析 | 第74-75页 |
4.4 本章小结 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-80页 |
第5章 总结与展望 | 第80-82页 |
5.1 总结 | 第80-81页 |
5.2 展望 | 第81-82页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |