| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩写汇总 | 第12-16页 |
| 1 引言 | 第16-44页 |
| 1.1 经典的wnt信号通路 | 第16-18页 |
| 1.2 非经典的Wnt信号通路 | 第18-19页 |
| 1.3 Wnt信号通路与干细胞的自我更新 | 第19-22页 |
| 1.4 Wnt信号通路在癌症发生中的作用 | 第22-23页 |
| 1.5 Wnt信号通路在免疫调节方面中的作用 | 第23-25页 |
| 1.6 LGR蛋白家族 | 第25-30页 |
| 1.7 R-sponding分泌蛋白家族以及它们的功能 | 第30-34页 |
| 1.8 R-spondin蛋白和Wnt蛋白协同激活Wnt/β-catenin信号通路 | 第34-35页 |
| 1. 9 Leucine rich repeat 蛋白基序特征及 leucine-rich repeathybrid技术应用 | 第35-38页 |
| 1.10 蛋白质结晶与结构解析原理 | 第38-42页 |
| 1.10.1 生物大分子结晶原理 | 第38-40页 |
| 1.10.2 分子置换法 | 第40-42页 |
| 1.11 该课题研究的目的与意义 | 第42-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-64页 |
| 2.1 实验材料 | 第44页 |
| 2.2 实验试剂 | 第44-46页 |
| 2.2.1 分子克隆以及蛋白纯化相关 | 第44-45页 |
| 2.2.2 蛋白结晶耗材相关 | 第45-46页 |
| 2.3 实验方法及步骤 | 第46-63页 |
| 2.3.1 插入目的基因的表达载体的构建 | 第46-50页 |
| 2.3.2 利用昆虫细胞表达系统来表达LGR4以及RSPO1蛋白 | 第50-58页 |
| 2.3.3 LGR4以及RSPO1的纯化与结晶 | 第58-61页 |
| 2.3.4 LGR4_(15)单个蛋白和LGR4_9-VLR/RSPO1复合物的结晶与结构解析 | 第61-63页 |
| 2.4 TOP/FOPFlash实验 | 第63-64页 |
| 3 结果与讨论 | 第64-95页 |
| 3.1 LGR4以及Rspo1的表达与纯化 | 第64-67页 |
| 3.2 RSPO1(34-135)单个蛋白以及LGR4(28-528)/RSPO1(34-135)复合物的表达与纯化 | 第67-69页 |
| 3.3 LGR4-VLR嵌合体蛋白以及LGR4-VLR/RSPO1复合物的表达与纯化 | 第69-70页 |
| 3.4 LGR4-VLR嵌合体蛋白以及LGR4-VLR/RSPO1复合物的结晶与结构解析 | 第70-73页 |
| 3.5 LGR4蛋白受体胞外结构域的三维结构 | 第73-77页 |
| 3.6 LGR4和RSPO1复合物的三维结构 | 第77-80页 |
| 3.7 和LGR4结合的RSPO1的三维结构 | 第80-84页 |
| 3.8 RSPO1以及LGR4上主要作用位点的突变分析 | 第84-86页 |
| 3.9 RSPO1在结合LGR4受体后导致LGR4以及RSPO1构型的改变 | 第86-89页 |
| 3.10 LGR4 和 LGR5及 LGR6 的比较 | 第89-90页 |
| 3.11 B型LGRs受体和A型以及C型LGRs受体在识别配体方面的区别 | 第90-92页 |
| 3.12 R-spondin配体具有诱导LGRs受体多聚化的潜力 | 第92-95页 |
| 4 研究项目的总结以及应用价值 | 第95-98页 |
| 5 参考文献 | 第98-105页 |
| 作者简历及科研成果 | 第105页 |
