| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| 1.1 转基因作物的种植 | 第11-12页 |
| 1.2 Bt毒蛋白的种类及结构 | 第12-19页 |
| 1.2.1 Bt毒蛋白的分类 | 第12-15页 |
| 1.2.2 Bt毒蛋白Cry毒素的结构 | 第15-19页 |
| 1.3 Cry毒素的作用机制 | 第19-22页 |
| 1.3.1 穿孔模型 | 第19-21页 |
| 1.3.2 信号通路模型 | 第21-22页 |
| 1.4 靶标害虫Bt抗性产生因素 | 第22-25页 |
| 1.4.1 生化水平 | 第22-23页 |
| 1.4.2 分子水平 | 第23-25页 |
| 1.5 ABC蛋白转运家族 | 第25-27页 |
| 1.5.1 ABC蛋白的结构域功能 | 第25-26页 |
| 1.5.2 ABCG蛋白亚家族 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 供试昆虫以及饲养条件 | 第28-29页 |
| 2.1.2 实验所用试剂以及出产公司 | 第29-31页 |
| 2.2 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.3 各种培养基以及溶液的配制 | 第32-34页 |
| 2.3.1 细胞培养基以及转染溶液的配制 | 第32-33页 |
| 2.3.2 昆虫细胞以及培养方法 | 第33-34页 |
| 2.3.3 研究中用到的菌体和质粒 | 第34页 |
| 2.4 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.4.1 棉铃虫总RNA的提取、cDNA第一链的合成 | 第34页 |
| 2.4.2 HaABCG1基因的生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 2.4.3 系统树的构建 | 第35-36页 |
| 2.4.4 PCR引物和探针的设计与合成 | 第36-37页 |
| 2.4.5 RNAi与实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 2.4.6 目的基因的扩增及克隆 | 第38页 |
| 2.4.7 供体质粒pEGFP-N1/HaABCG1的构建 | 第38页 |
| 2.4.8 昆虫细胞的培养以及重组质粒转染细胞 | 第38-39页 |
| 2.4.9 HaABCG1蛋白的亚细胞定位 | 第39页 |
| 2.4.10 HaABCG1介导不同Bt毒素毒力的细胞功能验证 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-50页 |
| 3.1 HaABCG1基因的克隆及蛋白序列分析 | 第40-44页 |
| 3.1.1 HaABCG1基因的PCR扩增及克隆鉴定 | 第40页 |
| 3.1.2 分析蛋白序列 | 第40-44页 |
| 3.2 HaABCG1基因的进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.3 构建昆虫细胞表达载体 | 第45-47页 |
| 3.4 HaABCG1-GFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第47页 |
| 3.5 HaABCG1介导几种Bt毒素的细胞毒力功能验证 | 第47-48页 |
| 3.6 RNAi和生物测定分析HaABCG1基因功能 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 ABCG1基因不介导Cry1Ac毒素的毒力 | 第50-51页 |
| 4.1.1 棉铃虫ABCG1不是Cry1Ac毒素的受体 | 第50页 |
| 4.1.2 HaABCG1基因的下调表达与Cry1Ac毒素的关系 | 第50-51页 |
| 4.2 HaABCG1与其他Bt蛋白之间的关系 | 第51-52页 |
| 4.3 ABCG1的变异与其他靶标害虫的关系 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-70页 |
| 7 致谢 | 第70-72页 |
| 8 硕士期间发表的文章 | 第72页 |
