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缺陷假单胞菌HD13(Pseudomonas diminuta)抗植物病原真菌及其活性组分的研究

摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-29页
    1.1 缺陷假单胞菌概况第13页
    1.2 植物致病真菌病害第13-14页
    1.3 微生物及其生物防治第14-16页
        1.3.1 植物根际促生细菌(PGPR)第14-15页
        1.3.2 生物防治第15-16页
    1.4 假单胞菌假单胞菌产生的抗生素类型及其生防机制第16-23页
        1.4.1 假单胞菌产生的抗生素类型第16-20页
            1.4.1.1 吩嗪类第17页
            1.4.1.2 2,4-二乙酰藤黄酚第17-18页
            1.4.1.3 硝吡咯菌素第18-19页
            1.4.1.4 藤黄绿脓菌素第19-20页
            1.4.1.5 环状脂多肽第20页
            1.4.1.6 其它抗生素第20页
        1.4.2 假单胞菌产生抗生素的特点第20-21页
        1.4.3 抗生素的作用机制第21-23页
            1.4.3.1 作用于细胞膜第21页
            1.4.3.2 抑制细胞壁的合成第21-22页
            1.4.3.3 作用于蛋白质合成系统第22页
            1.4.3.4 抑制核酸的形成第22页
            1.4.3.5 干扰细胞能量代谢和电子传递体系第22-23页
    1.5 抗生素的提取分离方法第23-27页
        1.5.1 有效成分分离原理第23-24页
        1.5.2 发酵液的预处理第24-25页
        1.5.3 抗生素分离纯化技术第25-26页
            1.5.3.1 萃取法第25页
            1.5.3.2 色谱法第25页
            1.5.3.3 吸附法第25-26页
        1.5.4 纯化第26-27页
    1.6 论文设计思想第27-29页
        1.6.1 立体依据第27-28页
        1.6.2 研究内容第28-29页
第二章 材料与方法第29-45页
    2.1 供试材料第29-31页
        2.1.1 菌种第29-30页
        2.1.2 主要药品和试剂第30页
        2.1.3 主要仪器第30-31页
        2.1.4 主要培养基第31页
    2.2 实验方法第31-45页
        2.2.1 主要培养基的优化第31-33页
            2.2.1.1 菌株活化第31页
            2.2.1.2 菌株HD13对不同植物病原真菌抗菌活性的影响第31页
            2.2.1.3 初始培养基的筛选第31-32页
            2.2.1.4 最佳碳源的筛选第32页
            2.2.1.5 最佳氮源的筛选第32页
            2.2.1.6 无机盐对抑菌活性的影响第32页
            2.2.1.7 K_2HPO_4与抑菌活性第32-33页
            2.2.1.8 氯化钠与抑菌活性第33页
            2.2.1.9 发酵培养基主要成分的正交试验第33页
        2.2.2 培养条件的优化第33-34页
            2.2.2.1 培养基初始pH值的考察第33页
            2.2.2.2 接种量对抑菌活性的影响第33-34页
            2.2.2.3 菌株HD13最佳吸收波长的测定第34页
            2.2.2.4 菌株HD13最佳发酵时间的测定第34页
            2.2.2.5 不同培养方式的考察第34页
        2.2.3 发酵液抑菌活性的稳定研究第34-36页
            2.2.3.1 分泌类型的检验第34页
            2.2.3.2 发酵液热稳定性的考察第34-35页
            2.2.3.3 pH对发酵液抑菌活性的影响第35页
            2.2.3.4 不同硫酸铵饱和度对发酵液抑菌活性的影响第35页
            2.2.3.5 紫外光对发酵液抑菌活性的影响第35页
            2.2.3.6 储存时间对发酵液抑菌活性的影响第35页
            2.2.3.7 不同浓度发酵液对抑菌活性的影响第35页
            2.2.3.8 发酵液OD值与生物量的关系第35-36页
            2.2.3.9 OD值与发酵产物抑菌活性的关系第36页
        2.2.4 活性组分的分离纯化第36-41页
            2.2.4.1 技术路线第36-37页
            2.2.4.2 发酵产物的累积第37-38页
            2.2.4.3 不同有机试萃取发酵液的活性第38页
            2.2.4.4 提取物效价的测定第38页
            2.2.4.5 硅胶柱层析分离第38-39页
            2.2.4.6 葡聚糖凝胶LH-20分离第39-40页
            2.2.4.7 活性组分的TLC层析第40页
            2.2.4.8 活性组分的HPLC检测第40页
            2.2.4.9 活性组分及其抑菌活性的初步分析第40-41页
        2.2.5 组分A抗植物病原真菌的活性初探第41-44页
            2.2.5.1 组分A对不同植物病原真菌的抑菌活性第41页
            2.2.5.2 组分A水稻纹枯病菌丝体形态的影响第41页
            2.2.5.3 水稻纹枯病菌丝体生长曲线的确定第41页
            2.2.5.4 组分A对水稻纹枯病菌丝体生长的影响第41-42页
            2.2.5.5 组分A对水稻纹枯病菌丝体细胞壁的影响第42页
            2.2.5.6 组分A对水稻纹枯病菌丝体细胞膜的影响第42-43页
            2.2.5.7 组分A对水稻纹枯病菌丝体细胞核DNA的影响第43-44页
        2.2.6 菌株HD13抑菌活性的稳定遗传第44-45页
            2.2.6.1 菌株HD13传代培养对抑菌活性的影响第44页
            2.2.6.2 菌株HD13传代培养对目标物质的影响第44-45页
第三章 结果与分析第45-74页
    3.1 主要培养基的优化第45-50页
        3.1.1 菌株HD13对不同植物病原真菌抗菌活性的影响第45页
        3.1.2 初始培养基的筛选第45-46页
        3.1.3 最佳碳源的筛选第46页
        3.1.4 最佳氮源的筛选第46-47页
        3.1.5 无机盐对抑菌活性的影响第47-48页
        3.1.6 K_2HPO_4与抑菌活性第48页
        3.1.7 氯化钠与抑菌活性第48-49页
        3.1.8 发酵培养基主要成分的正交试验第49-50页
    3.2 发酵条件的优化第50-54页
        3.2.1 培养基初始pH值的考察第50-51页
        3.2.2 接种量对抑菌活性的影响第51-52页
        3.2.3 菌株HD13最佳吸收波长的测定第52页
        3.2.4 菌株HD13最佳发酵时间的测定第52-53页
        3.2.5 不同培养方式的考察第53-54页
    3.3 发酵液抑菌活性的稳定研究第54-60页
        3.3.1 分泌类型的检验第54页
        3.3.2 发酵液热稳定性的考察第54-55页
        3.3.3 pH值对发酵液稳定性的影响第55-56页
        3.3.4 不同饱和度硫酸铵对发酵液抑菌活性的影响第56页
        3.3.5 紫外光对发酵液抑菌活性的影响第56-57页
        3.3.6 储存时间对发酵液抑菌活性的影响第57-58页
        3.3.7 不同浓度发酵液对抑菌活性的影响第58页
        3.3.8 发酵液OD值与生物量和抑菌活性的关系第58-60页
            3.3.8.1 OD值与生物量的关系第58-59页
            3.3.8.2 OD值与抗菌活性的关系第59-60页
    3.4 活性组分的分离纯化第60-65页
        3.4.1 不同有机试剂萃取发酵物后的抑菌活性第60-61页
        3.4.2 提取物效价的测定第61页
        3.4.3 硅胶柱层析第61-62页
        3.4.4 分子筛层析第62页
        3.4.5 活性组分的分析第62-65页
            3.4.5.1 活性组分的处理第62-63页
            3.4.5.2 活性组分的TLC层析第63页
            3.4.5.3 活性组分的HPLC检测第63-64页
            3.4.5.4 活性组分的初步分析第64-65页
            3.4.5.5 组分的抑菌活性评价第65页
    3.5 组分A抗植物病原真菌的活性初探第65-72页
        3.5.1 组分A对不同植物病原真菌的抑菌活性第65-66页
        3.5.2 组分A水稻纹枯病菌丝体形态的影响第66-67页
        3.5.3 水稻纹枯病菌丝体生长曲线的确定第67-68页
        3.5.4 组分A对水稻纹枯病菌丝体生长的影响第68页
        3.5.5 组分A对水稻纹枯病菌丝体细胞壁的影响第68-70页
        3.5.6 组分A对水稻纹枯病菌丝体细胞膜的影响第70-71页
        3.5.7 组分A对水稻纹枯病菌丝体细胞核DNA的影响第71-72页
    3.6 菌株HD13抑菌活性的稳定遗传第72-74页
        3.6.1 菌株HD13传代培养对抑菌活性的影响第72页
        3.6.2 菌株HD13传代培养对目标物质的影响第72-74页
第四章 小结与讨论第74-79页
    4.1 发酵条件的优化第74-75页
    4.2 发酵液抑菌活性的稳定研究第75-76页
    4.3 活性组分的分离纯化第76页
    4.4 组分A抗植物病原真菌的活性初探第76-77页
    4.5 菌株HD13抑菌活性的稳定遗传第77-79页
第五章 结论与展望第79-81页
    5.1 结论第79-80页
    5.2 展望第80-81页
参考文献第81-90页
附录第90-91页
致谢第91-92页

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