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土星拟威尔酵母WC91-2菌株嗜杀因子和β-1,3-葡聚糖酶的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-44页
 1 海洋酵母菌资源概述第14-21页
   ·海洋环境中的酵母菌资源第14-18页
     ·海洋酵母菌的种类和分布第14-16页
     ·深海热液生态系统的海洋酵母菌第16页
     ·河口和红树林地区的海洋酵母菌第16-17页
     ·海洋酵母菌的功能及应用第17-18页
   ·海水养殖环境中的致病酵母菌第18-21页
 2 嗜杀酵母和嗜杀因子第21-38页
   ·自然界中的嗜杀现象第21-22页
   ·嗜杀因子的特征第22-25页
     ·嗜杀因子的生理生化性质第22-23页
     ·产生嗜杀因子的条件第23-24页
     ·嗜杀因子的作用特点第24页
     ·嗜杀酵母的分离和嗜杀活性的检测第24-25页
   ·海洋环境中的嗜杀酵母菌第25-27页
   ·嗜杀因子的机理第27-34页
     ·嗜杀因子的作用机制第28-33页
     ·嗜杀酵母的免疫机制第33-34页
   ·嗜杀酵母和嗜杀因子的应用第34-38页
     ·嗜杀酵母菌在发酵工业中的应用第35页
     ·嗜杀因子作为新型抗真菌药物的潜在应用第35-36页
     ·在抗食品及饲料腐烂中的应用第36-37页
     ·嗜杀因子在分类学上的应用第37页
     ·在基因工程中的应用第37-38页
 3 β-1,3-葡聚糖酶概述第38-42页
   ·β-葡聚糖酶的底物——β-葡聚糖第38-39页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的分类和作用特点第39-40页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的功能第40-41页
   ·真菌β-1,3-葡聚糖酶基因的研究现状第41-42页
 4 论文的研究依据和主要的研究内容第42-44页
第二章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的纯化和特性研究第44-60页
 0 前言第44页
 1 材料与方法第44-51页
 2 结果与讨论第51-59页
   ·海洋酵母WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化第51-54页
   ·β-1,3-葡聚糖酶对海带多糖水解产物的分析第54页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的嗜杀活性第54-55页
   ·质谱分析鉴定第55页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度和温度稳定性第55-56页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的最适反应pH和pH稳定性第56-57页
   ·不同金属离子对β-1,3-葡聚糖酶活性的影响第57页
   ·不同蛋白抑制剂对β-1,3-葡聚糖酶活性的影响第57-58页
   ·β-1,3-葡聚糖酶动力学常数的测定第58-59页
 3 本章小结第59-60页
第三章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株嗜杀因子的纯化、性质和基因克隆第60-79页
 0 前言第60页
 1 材料与方法第60-69页
 2 结果与讨论第69-78页
   ·海洋酵母WC91-2菌株嗜杀因子的分离纯化第69-71页
   ·纯化嗜杀因子的嗜杀活性第71页
   ·嗜杀因子水解海带多糖的能力第71-72页
   ·海洋酵母WC91-2菌株嗜杀因子的特性研究第72-74页
     ·不同盐度条件下嗜杀因子的抑菌作用第72-73页
     ·温度对嗜杀因子嗜杀活性的影响第73页
     ·pH值对嗜杀因子嗜杀活性的影响第73-74页
   ·海洋酵母WC91-2菌株嗜杀因子的基因克隆第74-78页
     ·海洋酵母WC91-2菌株基因组DNA的提取第74-75页
     ·嗜杀因子基因的PCR扩增结果第75-77页
     ·嗜杀因子基因的测序结果及分析第77-78页
 3 本章小结第78-79页
第四章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株嗜杀因子和β-1,3-葡聚糖酶之间的相互关系第79-89页
 0 前言第79-80页
 1 材料与方法第80-82页
 2 结果与讨论第82-88页
   ·WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶对纯化的嗜杀因子嗜杀活性的影响第82-84页
   ·海带多糖或敏感菌株WCY细胞的吸附对纯化的WC91-2嗜杀因子嗜杀活性的影响第84-85页
   ·纯化的β-1,3-葡聚糖酶与敏感酵母WCY细胞结合后对嗜杀因子嗜杀活性的影响第85页
   ·WC91-2嗜杀因子对敏感酵母WCY细胞原生质体的嗜杀活性第85-87页
   ·嗜杀因子作用于完整的敏感酵母WCY细胞第87-88页
 3 本章小结第88-89页
第五章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的基因克隆与信息学分析第89-107页
 0 前言第89-90页
 1 材料与方法第90-96页
 2 结果与讨论第96-106页
   ·简并PCR克隆获得WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的部分基因第96-98页
   ·反向PCR克隆获得WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的全部基因第98-101页
   ·WsEXG1基因序列的信息学分析第101-102页
   ·从WsEXG1基因推导的W.saturnus WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶蛋白的分析第102-106页
 3 本章小结第106-107页
第六章 海洋酵母WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的表达及重组酶的纯化、特性研究第107-127页
 0 前言第107-108页
 1 材料与方法第108-117页
 2 结果与讨论第117-126页
   ·表达质粒pINA1317-EXG1的构建第117-119页
   ·含WsEXG1基因的大片段转化Y.lipolytica Po1h及阳性转化子的筛选第119页
   ·阳性转化子的β-1,3-葡聚糖酶活性测定第119-120页
   ·重组β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化第120-122页
   ·重组β-1,3-葡聚糖酶的性质研究第122-126页
     ·重组β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度及温度稳定性第122页
     ·重组β-1,3-葡聚糖酶的最适反应pH及pH稳定性第122-123页
     ·不同金属离子对重组β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第123页
     ·不同蛋白抑制剂对重组β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第123-124页
     ·重组β-1,3-葡聚糖酶动力学常数的测定第124-125页
     ·重组β-1,3-葡聚糖酶水解海带多糖的能力第125-126页
 3 本章小结第126-127页
论文的创新点与展望第127-128页
参考文献第128-139页
附录:英文缩写符号及其中英文名称第139-141页
攻读博士学位期间发表的学术论文第141-142页
致谢第142页

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