摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-44页 |
1 海洋酵母菌资源概述 | 第14-21页 |
·海洋环境中的酵母菌资源 | 第14-18页 |
·海洋酵母菌的种类和分布 | 第14-16页 |
·深海热液生态系统的海洋酵母菌 | 第16页 |
·河口和红树林地区的海洋酵母菌 | 第16-17页 |
·海洋酵母菌的功能及应用 | 第17-18页 |
·海水养殖环境中的致病酵母菌 | 第18-21页 |
2 嗜杀酵母和嗜杀因子 | 第21-38页 |
·自然界中的嗜杀现象 | 第21-22页 |
·嗜杀因子的特征 | 第22-25页 |
·嗜杀因子的生理生化性质 | 第22-23页 |
·产生嗜杀因子的条件 | 第23-24页 |
·嗜杀因子的作用特点 | 第24页 |
·嗜杀酵母的分离和嗜杀活性的检测 | 第24-25页 |
·海洋环境中的嗜杀酵母菌 | 第25-27页 |
·嗜杀因子的机理 | 第27-34页 |
·嗜杀因子的作用机制 | 第28-33页 |
·嗜杀酵母的免疫机制 | 第33-34页 |
·嗜杀酵母和嗜杀因子的应用 | 第34-38页 |
·嗜杀酵母菌在发酵工业中的应用 | 第35页 |
·嗜杀因子作为新型抗真菌药物的潜在应用 | 第35-36页 |
·在抗食品及饲料腐烂中的应用 | 第36-37页 |
·嗜杀因子在分类学上的应用 | 第37页 |
·在基因工程中的应用 | 第37-38页 |
3 β-1,3-葡聚糖酶概述 | 第38-42页 |
·β-葡聚糖酶的底物——β-葡聚糖 | 第38-39页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的分类和作用特点 | 第39-40页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的功能 | 第40-41页 |
·真菌β-1,3-葡聚糖酶基因的研究现状 | 第41-42页 |
4 论文的研究依据和主要的研究内容 | 第42-44页 |
第二章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的纯化和特性研究 | 第44-60页 |
0 前言 | 第44页 |
1 材料与方法 | 第44-51页 |
2 结果与讨论 | 第51-59页 |
·海洋酵母WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第51-54页 |
·β-1,3-葡聚糖酶对海带多糖水解产物的分析 | 第54页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的嗜杀活性 | 第54-55页 |
·质谱分析鉴定 | 第55页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度和温度稳定性 | 第55-56页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的最适反应pH和pH稳定性 | 第56-57页 |
·不同金属离子对β-1,3-葡聚糖酶活性的影响 | 第57页 |
·不同蛋白抑制剂对β-1,3-葡聚糖酶活性的影响 | 第57-58页 |
·β-1,3-葡聚糖酶动力学常数的测定 | 第58-59页 |
3 本章小结 | 第59-60页 |
第三章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株嗜杀因子的纯化、性质和基因克隆 | 第60-79页 |
0 前言 | 第60页 |
1 材料与方法 | 第60-69页 |
2 结果与讨论 | 第69-78页 |
·海洋酵母WC91-2菌株嗜杀因子的分离纯化 | 第69-71页 |
·纯化嗜杀因子的嗜杀活性 | 第71页 |
·嗜杀因子水解海带多糖的能力 | 第71-72页 |
·海洋酵母WC91-2菌株嗜杀因子的特性研究 | 第72-74页 |
·不同盐度条件下嗜杀因子的抑菌作用 | 第72-73页 |
·温度对嗜杀因子嗜杀活性的影响 | 第73页 |
·pH值对嗜杀因子嗜杀活性的影响 | 第73-74页 |
·海洋酵母WC91-2菌株嗜杀因子的基因克隆 | 第74-78页 |
·海洋酵母WC91-2菌株基因组DNA的提取 | 第74-75页 |
·嗜杀因子基因的PCR扩增结果 | 第75-77页 |
·嗜杀因子基因的测序结果及分析 | 第77-78页 |
3 本章小结 | 第78-79页 |
第四章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株嗜杀因子和β-1,3-葡聚糖酶之间的相互关系 | 第79-89页 |
0 前言 | 第79-80页 |
1 材料与方法 | 第80-82页 |
2 结果与讨论 | 第82-88页 |
·WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶对纯化的嗜杀因子嗜杀活性的影响 | 第82-84页 |
·海带多糖或敏感菌株WCY细胞的吸附对纯化的WC91-2嗜杀因子嗜杀活性的影响 | 第84-85页 |
·纯化的β-1,3-葡聚糖酶与敏感酵母WCY细胞结合后对嗜杀因子嗜杀活性的影响 | 第85页 |
·WC91-2嗜杀因子对敏感酵母WCY细胞原生质体的嗜杀活性 | 第85-87页 |
·嗜杀因子作用于完整的敏感酵母WCY细胞 | 第87-88页 |
3 本章小结 | 第88-89页 |
第五章 海洋酵母W.saturnus WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的基因克隆与信息学分析 | 第89-107页 |
0 前言 | 第89-90页 |
1 材料与方法 | 第90-96页 |
2 结果与讨论 | 第96-106页 |
·简并PCR克隆获得WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的部分基因 | 第96-98页 |
·反向PCR克隆获得WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶的全部基因 | 第98-101页 |
·WsEXG1基因序列的信息学分析 | 第101-102页 |
·从WsEXG1基因推导的W.saturnus WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶蛋白的分析 | 第102-106页 |
3 本章小结 | 第106-107页 |
第六章 海洋酵母WC91-2菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的表达及重组酶的纯化、特性研究 | 第107-127页 |
0 前言 | 第107-108页 |
1 材料与方法 | 第108-117页 |
2 结果与讨论 | 第117-126页 |
·表达质粒pINA1317-EXG1的构建 | 第117-119页 |
·含WsEXG1基因的大片段转化Y.lipolytica Po1h及阳性转化子的筛选 | 第119页 |
·阳性转化子的β-1,3-葡聚糖酶活性测定 | 第119-120页 |
·重组β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第120-122页 |
·重组β-1,3-葡聚糖酶的性质研究 | 第122-126页 |
·重组β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度及温度稳定性 | 第122页 |
·重组β-1,3-葡聚糖酶的最适反应pH及pH稳定性 | 第122-123页 |
·不同金属离子对重组β-1,3-葡聚糖酶活力的影响 | 第123页 |
·不同蛋白抑制剂对重组β-1,3-葡聚糖酶活力的影响 | 第123-124页 |
·重组β-1,3-葡聚糖酶动力学常数的测定 | 第124-125页 |
·重组β-1,3-葡聚糖酶水解海带多糖的能力 | 第125-126页 |
3 本章小结 | 第126-127页 |
论文的创新点与展望 | 第127-128页 |
参考文献 | 第128-139页 |
附录:英文缩写符号及其中英文名称 | 第139-141页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第141-142页 |
致谢 | 第142页 |