摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-22页 |
1.1 咔唑的概述 | 第13-14页 |
1.1.1 咔唑的性质 | 第13-14页 |
1.1.2 咔唑来源及环境污染现状 | 第14页 |
1.1.3 咔唑的危害 | 第14页 |
1.2 咔唑的微生物降解 | 第14-21页 |
1.2.1 上游降解途径 | 第15-18页 |
1.2.2 下游降解途径 | 第18-19页 |
1.2.3 咔唑降解基因簇 | 第19-20页 |
1.2.4 咔唑降解基因簇的调控 | 第20-21页 |
1.3 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 咔唑降解菌的分离、鉴定及降解特性的研究 | 第22-33页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 实验试剂 | 第22页 |
2.1.2 培养基 | 第22页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-24页 |
2.2.1 降解菌的分离和纯化 | 第22-23页 |
2.2.2 菌株的形态和生理生化鉴定 | 第23页 |
2.2.3 菌株 16S rRNA基因序列的分析 | 第23页 |
2.2.4 菌株生长曲线测定 | 第23页 |
2.2.5 菌株降解特性的研究 | 第23-24页 |
2.2.6 土壤原位修复模拟 | 第24页 |
2.2.7 实验数据分析 | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-31页 |
2.3.1 菌落形态和生理生化特性 | 第24-25页 |
2.3.2 B1菌株的 16S rRNA基因的PCR扩增和序列鉴定 | 第25-27页 |
2.3.3 B1菌株的生长曲线 | 第27页 |
2.3.4 B1菌株对咔唑降解能力的测定 | 第27-28页 |
2.3.5 环境因素对降解效率的影响 | 第28-30页 |
2.3.6 B1菌株对不同底物的降解能力 | 第30页 |
2.3.7 土壤原位修复模拟 | 第30-31页 |
2.4 小结与讨论 | 第31-33页 |
第三章 B1菌株咔唑降解基因簇的分析与表达研究 | 第33-46页 |
3.1 实验材料 | 第33页 |
3.1.1 主要试剂、菌株和载体 | 第33页 |
3.1.2 培养基和相关溶液 | 第33页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第33页 |
3.2 实验方法 | 第33-38页 |
3.2.1 咔唑降解基因簇的分析 | 第33页 |
3.2.2 基因保守区的获得 | 第33-35页 |
3.2.3 RNA的提取 | 第35-37页 |
3.2.4 RT-PCR实验 | 第37页 |
3.2.5 qRT-PCR实验 | 第37-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-45页 |
3.3.1 咔唑降解基因簇的分析 | 第38-40页 |
3.3.2 保守基因的扩增 | 第40-41页 |
3.3.3 测序结果分析 | 第41页 |
3.3.4 RNA提取 | 第41-42页 |
3.3.5 降解基因簇表达模式的研究 | 第42页 |
3.3.6 qRT-PCR实验结果 | 第42-45页 |
3.4 小结与讨论 | 第45-46页 |
第四章 咔唑降解基因簇中carB基因的克隆与表达 | 第46-63页 |
4.1 实验材料 | 第46-47页 |
4.1.1 主要试剂、菌株和载体 | 第46页 |
4.1.2 培养基和缓冲液 | 第46页 |
4.1.3 主要实验仪器 | 第46-47页 |
4.2 实验方法 | 第47-52页 |
4.2.1 carB、carBa和carBb基因的扩增 | 第47页 |
4.2.2 表达载体的构建 | 第47-49页 |
4.2.3 CarB、CarBa和CarBb的生物信息学分析 | 第49页 |
4.2.4 CarB、CarBa和CarBb的诱导表达和检测 | 第49-51页 |
4.2.5 酶学性质分析 | 第51-52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-61页 |
4.3.1 克隆获得carB、carBa和carBb基因 | 第52页 |
4.3.2 CarB、CarBa和CarBb的生物信息学分析 | 第52-57页 |
4.3.3 蛋白质的表达和检测 | 第57-59页 |
4.3.4 CarB酶功能研究 | 第59页 |
4.3.5 酶学性质分析 | 第59-61页 |
4.4 小结与讨论 | 第61-63页 |
第五章 全文结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历 | 第74页 |