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利用启动子缺陷型打靶载体敲除五指山小型猪GGTA1基因

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-25页
   ·器官移植的发展障碍与解决对策第13-18页
     ·人类同种器官移植的现状第13页
     ·解决供体器官短缺的途径第13-15页
     ·异种移植面临的障碍与对策第15-18页
   ·大动物基因打靶技术研究进展第18-24页
     ·基因打靶的原理第18-20页
     ·大动物基因打靶技术新发展第20-23页
     ·大动物基因打靶技术应用第23-24页
   ·近交系五指山猪的特点第24-25页
第二章 启动子缺陷型打靶载体的构建第25-39页
   ·材料与方法第25-35页
     ·实验材料第25-28页
     ·实验方法第28-35页
   ·结果与分析第35-38页
     ·五指山小型猪基因组DNA的提取第35页
     ·打靶同源短臂的PCR扩增第35-36页
     ·同源长臂的PCR扩增第36页
     ·打靶载体pBS-GGTA1-SKO的构建及鉴定第36-37页
     ·打靶载体pBS-GGTA1-SKO测序第37-38页
   ·讨论第38-39页
第三章 五指山小型猪成纤维胎儿细胞的转染筛选与鉴定第39-44页
   ·材料和方法第39-41页
     ·实验材料第39页
     ·实验方法第39-41页
   ·结果与分析第41-43页
     ·打靶载体pBS-GGTA1-KO使之线性化第41-42页
     ·猪胎儿成纤维细胞转染筛选及PCR鉴定第42-43页
     ·阳性克隆点的DNA测序第43页
   ·讨论第43-44页
第四章 核移植与胚胎移植及克隆猪的鉴定第44-49页
   ·材料与方法第44-47页
     ·实验材料第44页
     ·实验方法第44-47页
   ·结果与分析第47-48页
     ·基因敲除克隆胚胎移植后的体内发育第47页
     ·克隆猪的鉴定第47-48页
   ·讨论第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-60页
攻读学位期间发表论文第60-61页
附录第61-63页
致谢第63-65页
统计学证明第65页

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