摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·器官移植的发展障碍与解决对策 | 第13-18页 |
·人类同种器官移植的现状 | 第13页 |
·解决供体器官短缺的途径 | 第13-15页 |
·异种移植面临的障碍与对策 | 第15-18页 |
·大动物基因打靶技术研究进展 | 第18-24页 |
·基因打靶的原理 | 第18-20页 |
·大动物基因打靶技术新发展 | 第20-23页 |
·大动物基因打靶技术应用 | 第23-24页 |
·近交系五指山猪的特点 | 第24-25页 |
第二章 启动子缺陷型打靶载体的构建 | 第25-39页 |
·材料与方法 | 第25-35页 |
·实验材料 | 第25-28页 |
·实验方法 | 第28-35页 |
·结果与分析 | 第35-38页 |
·五指山小型猪基因组DNA的提取 | 第35页 |
·打靶同源短臂的PCR扩增 | 第35-36页 |
·同源长臂的PCR扩增 | 第36页 |
·打靶载体pBS-GGTA1-SKO的构建及鉴定 | 第36-37页 |
·打靶载体pBS-GGTA1-SKO测序 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
第三章 五指山小型猪成纤维胎儿细胞的转染筛选与鉴定 | 第39-44页 |
·材料和方法 | 第39-41页 |
·实验材料 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-41页 |
·结果与分析 | 第41-43页 |
·打靶载体pBS-GGTA1-KO使之线性化 | 第41-42页 |
·猪胎儿成纤维细胞转染筛选及PCR鉴定 | 第42-43页 |
·阳性克隆点的DNA测序 | 第43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
第四章 核移植与胚胎移植及克隆猪的鉴定 | 第44-49页 |
·材料与方法 | 第44-47页 |
·实验材料 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-47页 |
·结果与分析 | 第47-48页 |
·基因敲除克隆胚胎移植后的体内发育 | 第47页 |
·克隆猪的鉴定 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
攻读学位期间发表论文 | 第60-61页 |
附录 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
统计学证明 | 第65页 |