| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第13-18页 |
| 1.1 猪圆环病毒病的流行与危害 | 第13页 |
| 1.2 猪圆环病毒的病原学特征 | 第13-15页 |
| 1.2.1 PCV基因结构及病毒蛋白生物学活性 | 第14页 |
| 1.2.2 PCV感染及其致病相关机理 | 第14-15页 |
| 1.3 PCV2疫苗研究进展 | 第15页 |
| 1.4 乳酸菌表达系统的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 质粒、菌种 | 第18页 |
| 2.1.2 抗体制剂 | 第18页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第18页 |
| 2.1.4 引物 | 第18页 |
| 2.1.5 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.6 溶液配置 | 第19页 |
| 2.1.7 主要实验仪器与设备 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 表达PCV2 Cap蛋白重组乳酸乳球菌的构建 | 第20-25页 |
| 2.2.2 重组乳酸乳球菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.3 重组乳酸乳球菌在动物体内的存留性能分析 | 第26-28页 |
| 2.2.4 口服乳酸乳球菌免疫学指标的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.5 数据统计 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-45页 |
| 3.1 表达PCV2 CAP重组乳酸乳球菌的构建 | 第30-34页 |
| 3.1.1 目的基因的PCR扩增结果 | 第30页 |
| 3.1.2 重组质粒pMD19-T-Cap的鉴定结果 | 第30-32页 |
| 3.1.3 重组表达质粒pAMJ399-Cap的鉴定 | 第32-34页 |
| 3.2 重组乳酸乳球菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第34-36页 |
| 3.2.1 重组蛋白的SDS-PAGE和Western blot鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2.2 重组蛋白的间接免疫荧光检测 | 第35页 |
| 3.2.3 重组蛋白的间接ELISA检测 | 第35-36页 |
| 3.3 重组乳酸乳球菌的安全性评价结果 | 第36-41页 |
| 3.3.1 重组乳酸乳球菌生长动态分析结果 | 第36-37页 |
| 3.3.2 重组乳酸乳球菌在消化道环境中的生存性能分析结果 | 第37-38页 |
| 3.3.3 重组乳酸乳球菌在消化道内的存留能力分析结果 | 第38-41页 |
| 3.3.4 重组乳酸乳球菌对动物生产性能的影响 | 第41页 |
| 3.4 口服乳酸乳球菌免疫学指标的测定 | 第41-45页 |
| 3.4.1 免疫小鼠血清中抗PCV2-Cap特异性抗体IgG的测定结果 | 第41-42页 |
| 3.4.2 免疫小鼠粪便中抗PCV2-Cap特异性抗体sIgA的测定结果 | 第42-43页 |
| 3.4.3 免疫小鼠肠黏液中抗PCV2-Cap特异性抗体sIgA的测定结果 | 第43页 |
| 3.4.4 免疫小鼠血清中细胞因子测定结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 目的基因的选择 | 第45页 |
| 4.2 重组蛋白在宿主菌中的表达 | 第45-46页 |
| 4.3 重组菌在消化道内的存留情况 | 第46页 |
| 4.4 重组菌作为口服疫苗的安全性评价 | 第46-47页 |
| 4.5 重组菌口服免疫效果的评价 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
