摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 豆科植物与根瘤菌之间共生关系的建立 | 第11-12页 |
1.1.1 豆科植物和根瘤菌共生互作的分子机制 | 第11-12页 |
1.1.2 根瘤的类型 | 第12页 |
1.1.3 豆科植物结瘤特异性的富含半胱氨酸多肽 | 第12页 |
1.2 Cu对植物生长及共生固氮的影响 | 第12-14页 |
1.2.1 Cu对植物生长的影响 | 第12-13页 |
1.2.2 植物的铜胁迫响应 | 第13页 |
1.2.3 Cu对共生固氮的影响 | 第13-14页 |
1.3 几丁质酶在植物胁迫和共生中的作用 | 第14页 |
1.3.1 几丁质酶与植物的防御反应 | 第14页 |
1.3.2 几丁质酶在共生中的作用 | 第14页 |
1.4 选题依据和研究意义 | 第14-15页 |
1.5 研究内容及创新点 | 第15-16页 |
1.6 技术路线 | 第16-17页 |
第二章 CCP类基因的表达分析 | 第17-24页 |
2.1 引言 | 第17页 |
2.2 材料、试剂和仪器 | 第17页 |
2.3 实验方法 | 第17-21页 |
2.3.1 植物样品的种植和样品采取 | 第17-18页 |
2.3.2 样品获取和保藏 | 第18页 |
2.3.3 总RNA的提取 | 第18页 |
2.3.4 除去基因组DNA | 第18-19页 |
2.3.5 实时定量PCR引物设计 | 第19页 |
2.3.6 反应体系和实验程序 | 第19-20页 |
2.3.7 引物设计 | 第20-21页 |
2.4 结果与分析 | 第21-23页 |
2.4.1 样品RNA的检测与纯化 | 第21页 |
2.4.2 目的基因的qPCR分析 | 第21-23页 |
2.5 讨论 | 第23-24页 |
第三章 乙烯合成及信号传递相关基因的表达分析 | 第24-29页 |
3.1 引言 | 第24页 |
3.2 材料、试剂和仪器 | 第24页 |
3.3 试验方法 | 第24-25页 |
3.3.1 试验方法 | 第24页 |
3.3.2 引物设计 | 第24-25页 |
3.4 结果与分析 | 第25-28页 |
3.5 讨论 | 第28-29页 |
第四章 铜离子转运及结合相关基因的表达分析 | 第29-32页 |
4.1 引言 | 第29页 |
4.2 材料、试剂和仪器 | 第29页 |
4.3 试验方法 | 第29-30页 |
4.3.1 试验方法 | 第29页 |
4.3.2 引物设计 | 第29-30页 |
4.4 结果与分析 | 第30页 |
4.5 讨论 | 第30-32页 |
第五章 Cu33611在共生结瘤中的功能鉴定 | 第32-45页 |
5.1 引言 | 第32页 |
5.2 实验材料、试剂和仪器 | 第32页 |
5.3 实验方法 | 第32-36页 |
5.3.1 干扰载体的构建 | 第32-34页 |
5.3.2 重组质粒转化农杆菌 | 第34页 |
5.3.3 天蓝苜蓿的转化体系 | 第34-36页 |
5.4 干扰实验结果鉴定 | 第36-44页 |
5.4.1 Cu33611干扰目的片段的扩增 | 第36-37页 |
5.4.2 Cu33611干扰载体的构建 | 第37-38页 |
5.4.3 干扰组培苗的表型观察 | 第38-39页 |
5.4.4 干扰效率检测 | 第39-40页 |
5.4.5 Cu33611RNAi转化苗生长和结瘤分析 | 第40-42页 |
5.4.6 根瘤显微结构观察 | 第42-44页 |
5.5 讨论 | 第44-45页 |
第六章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录 1 | 第50-51页 |
附录 2 | 第51-54页 |
附录 3 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |