中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
引言 | 第11-18页 |
第一部分 冬凌草甲素对HepG_2细胞的抑制作用 | 第18-30页 |
1 实验试剂及仪器 | 第18-21页 |
1.1 肿瘤细胞、冬凌草甲素 | 第18页 |
1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
1.3 实验仪器 | 第19页 |
1.4 实验相关液体配制 | 第19-21页 |
2 实验方法 | 第21-24页 |
2.1 细胞培养 | 第21-22页 |
2.2 MTT检测冬凌草甲素对HepG_2细胞的抑制作用 | 第22-23页 |
2.3 结晶紫法测定细胞活性 | 第23-24页 |
2.4 统计学处理 | 第24页 |
3 实验结果 | 第24-27页 |
3.1 MTT实验结果 | 第24-25页 |
3.2 结晶紫染色结果 | 第25-27页 |
4 讨论 | 第27-30页 |
第二部分 冬凌草甲素对HepG_2细胞周期的影响 | 第30-37页 |
1 实验材料与仪器 | 第30-31页 |
1.1 HepG_2肿瘤细胞和冬凌草甲素 | 第30页 |
1.2 主要试剂及其耗材 | 第30页 |
1.3 实验仪器 | 第30-31页 |
1.4 PI溶液的配制 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-33页 |
2.1 细胞铺板 | 第31-32页 |
2.2 药物处理 | 第32页 |
2.3 收集细胞 | 第32页 |
2.4 细胞固定 | 第32页 |
2.5 PI染色及其上机 | 第32-33页 |
2.6 数据统计分析 | 第33页 |
3 结果 | 第33-35页 |
3.1 冬凌草甲素对HepG_2细胞周期的影响 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
第三部分 冬凌草甲素对HepG_2细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第37-56页 |
1 实验试剂和仪器 | 第37-42页 |
1.1 冬凌草甲素和肿瘤细胞 | 第37页 |
1.2 主要试剂及耗材 | 第37-38页 |
1.3 实验仪器设备 | 第38-39页 |
1.4 主要试剂配制 | 第39-42页 |
2 实验方法 | 第42-47页 |
2.1 细胞接种 | 第42页 |
2.2 药物处理 | 第42页 |
2.3 细胞总蛋白的提取 | 第42-43页 |
2.4 标准蛋白曲线的绘制 | 第43-44页 |
2.5 蛋白含量的测定 | 第44页 |
2.6 Western Blotting | 第44-47页 |
3 结果 | 第47-54页 |
3.1 冬凌草甲素对ATM、ATR、磷酸化ATM,ATR及其γ-H2AX蛋白表达的影响 | 第47-49页 |
3.2 冬凌草甲素能够增加磷酸化CHK1和CHK2蛋白表达 | 第49-51页 |
3.3 冬凌草甲素能够增加P53、磷酸化P53蛋白的表达 | 第51-52页 |
3.4 冬凌草甲素降低CDC25C蛋白的表达,增加P-CDC25C表达,而对CyclinB1无影响 | 第52-53页 |
3.5 冬凌草甲素增加磷酸化Cdk1的表达,降低Cdk1蛋白的表达 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |