| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 研究现状、成果 | 第13-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-15页 |
| 一、宫颈癌细胞中miR-101 抑制let-7a-1 的表达 | 第15-34页 |
| 1.1 材料和方法 | 第15-28页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第15-16页 |
| 1.1.2 分子生物学相关应用试剂 | 第16-17页 |
| 1.1.3 细胞培养相关应用试剂 | 第17页 |
| 1.1.4 细胞培养 | 第17页 |
| 1.1.5 引物序列 | 第17-19页 |
| 1.1.6 质粒构建 | 第19-23页 |
| 1.1.7 感受态的制备 | 第23-24页 |
| 1.1.8 细胞转染 | 第24-25页 |
| 1.1.9 实时定量PCR | 第25-28页 |
| 1.1.10 统计学分析 | 第28页 |
| 1.2 结果 | 第28-33页 |
| 1.2.1 生物信息学预测可与pre-let-7a-1 loop结合的候选miRNAs | 第28-29页 |
| 1.2.2 候选miRNAs过表达及封闭质粒的有效性验证 | 第29-30页 |
| 1.2.3 内源性验证候选miRNAs对let-7a-1 的调节 | 第30-31页 |
| 1.2.4 候选miRNAs不影响pre-let-7a-1 的表达 | 第31-32页 |
| 1.2.5 候选miRNAs不影响pri-let-7a-1 的表达 | 第32-33页 |
| 1.3 小结 | 第33-34页 |
| 二、miR-101 抑制let-7a-1 成熟体表达的机制研究 | 第34-45页 |
| 2.1 材料和方法 | 第34-39页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第34页 |
| 2.1.2 分子生物学相关应用试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.3 细胞培养相关应用试剂 | 第35页 |
| 2.1.4 细胞培养 | 第35页 |
| 2.1.5 引物序列 | 第35-36页 |
| 2.1.6 质粒构建 | 第36-37页 |
| 2.1.7 Western blot | 第37-39页 |
| 2.1.8 实时定量PCR | 第39页 |
| 2.1.9 统计学分析 | 第39页 |
| 2.2 结果 | 第39-44页 |
| 2.2.1 EGFP荧光水平检测miR-101 对pre-let-7a1loop的靶定作用 | 第39-40页 |
| 2.2.2 EGFP荧光水平检测miR-101 对pre-let-7a1loop-mut无靶定作用 | 第40-41页 |
| 2.2.3 EGFP蛋白水平检测miR-101 对EGFP-let-7a1loop/mut蛋白影响 | 第41-42页 |
| 2.2.4 内源性验证miR-101 对let-7a-1 表达的影响依赖其前体loop结构 | 第42-43页 |
| 2.2.5 蛋白水平验证miR-101 对let-7a-1 下游靶蛋白Aurora表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.3 小结 | 第44-45页 |
| 三、miR-101 与pre-let-7a-1 loop结构的结合依赖于Ago2 | 第45-50页 |
| 3.1 材料和方法 | 第45-47页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第45页 |
| 3.1.2 分子生物学相关应用试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 细胞培养相关应用试剂 | 第45页 |
| 3.1.4 细胞培养 | 第45页 |
| 3.1.5 Western blotting | 第45-46页 |
| 3.1.6 实时定量PCR | 第46页 |
| 3.1.7 RIP | 第46-47页 |
| 3.1.8 统计学分析 | 第47页 |
| 3.2 结果 | 第47-49页 |
| 3.2.1 miR-101 调节let-7a-1 的表达依赖Ago2蛋白 | 第47-48页 |
| 3.2.2 miR-101 与let-7a-1 前体loop结构的结合发生在Ago2复合物内 | 第48页 |
| 3.2.3 miR-101 调节let-7a-1 的表达不依赖Dicer蛋白 | 第48-49页 |
| 3.3 小结 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第58-59页 |
| 综述 miRNA的生物调节 | 第59-81页 |
| 综述参考文献 | 第68-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 个人简历 | 第82页 |
