| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 百合概述 | 第11页 |
| 1.2 百合病毒病 | 第11-12页 |
| 1.2.1 百合病毒种类及危害 | 第11-12页 |
| 1.2.2 百合病毒病的生物学防治 | 第12页 |
| 1.3 百合无症病毒的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.1 LSV的传播及症状 | 第13页 |
| 1.3.2 LSV的分子生物学特征 | 第13-14页 |
| 1.4 运动蛋白研究进展 | 第14-18页 |
| 1.4.1 病毒在细胞间的运动 | 第14页 |
| 1.4.2 运动蛋白作用的基础 | 第14页 |
| 1.4.3 运动蛋白的分类 | 第14-17页 |
| 1.4.4 运动蛋白介导的抗病性 | 第17-18页 |
| 1.5 研究的目的、意义及内容 | 第18-19页 |
| 1.5.1 研究目的、意义 | 第18页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 2 百合无症病毒TGB基因的克隆及三基因的生物信息学分析 | 第19-39页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 百合叶片总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 百合无症病毒运动蛋白基因的获得 | 第21-22页 |
| 2.2.3 重组质粒的克隆与检测 | 第22-24页 |
| 2.2.4 克隆片段序列的测定 | 第24页 |
| 2.2.5 TGB1,TGB2,TGB3的获得 | 第24-25页 |
| 2.2.6 生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第26-29页 |
| 2.3.1 提取的百合叶片总RNA | 第26页 |
| 2.3.2 获得的TGB基因 | 第26-28页 |
| 2.3.3 获得的三段TGB基因 | 第28-29页 |
| 2.4 生物信息学分析结果及分析 | 第29-36页 |
| 2.4.1 TGB三段基因序列分析 | 第29-30页 |
| 2.4.2 TGB蛋白氨基酸序列分析 | 第30-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-38页 |
| 2.6 小结 | 第38-39页 |
| 3 TGBp1原核表达及纯化 | 第39-52页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第39-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第40-41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.2.1 表达载体pET-TGB1的构建 | 第41-42页 |
| 3.2.2 融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
| 3.2.3 融合蛋白的Western-Blot检测 | 第43页 |
| 3.2.4 融合蛋白的质谱分析 | 第43页 |
| 3.2.5 融合蛋白的纯化 | 第43-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-51页 |
| 3.3.1 构建的表达载体 | 第45-46页 |
| 3.3.2 诱导表达融合蛋白 | 第46-47页 |
| 3.3.3 Western-Blot检测融合蛋白 | 第47-48页 |
| 3.3.4 质谱检测 | 第48-49页 |
| 3.3.5 融合蛋白纯化 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51页 |
| 3.5 小结 | 第51-52页 |
| 4 TGB蛋白在洋葱细胞中的定位 | 第52-67页 |
| 4.1 实验材料及仪器 | 第52-54页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第53-54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-61页 |
| 4.2.1 目的基因片段的获得 | 第54-57页 |
| 4.2.2 双元表达载体pTF-35S-X的构建 | 第57-59页 |
| 4.2.3 目的基因的亚细胞定位 | 第59-61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-66页 |
| 4.3.1 获得的目的基因片段 | 第61-63页 |
| 4.3.2 构建的双元表达载体pTF-35S-X | 第63-64页 |
| 4.3.3 目的基因的亚细胞定位 | 第64-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66页 |
| 4.5 小结 | 第66-67页 |
| 5 结论与展望 | 第67-68页 |
| 5.1 结论 | 第67页 |
| 5.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录A 基因及氨基酸序列 | 第74-77页 |
| 附录B 论文中所用的DNA和蛋白Marker、质粒图谱 | 第77-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
