| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 弧菌及弧菌病研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.1 概述 | 第10页 |
| 1.1.2 弧菌病流行情况 | 第10-11页 |
| 1.2 副溶血弧菌研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 概述 | 第11页 |
| 1.2.2 副溶血弧菌研究情况 | 第11-12页 |
| 1.3 细菌胞内存活研究 | 第12-14页 |
| 1.3.1 细菌胞内存活的体外模型以及研究 | 第12-13页 |
| 1.3.2 细菌胞内存活的电镜观察 | 第13页 |
| 1.3.3 细菌胞内存活与致病性关系 | 第13-14页 |
| 1.3.4 药物对细菌胞内存活影响的研究 | 第14页 |
| 1.4 转座子及转座诱变技术 | 第14-15页 |
| 1.4.1 转座子 | 第14-15页 |
| 1.4.2 转座突变 | 第15页 |
| 1.4.3 Mini-Tn10的转座诱变机制 | 第15页 |
| 1.5 主要内容和意义 | 第15-17页 |
| 1.5.1 胞内存活缺失突变株的构建和筛选 | 第15-16页 |
| 1.5.2 胞内存活相关基因的克隆和鉴定 | 第16页 |
| 1.5.3 胞内存活相关基因功能研究 | 第16页 |
| 1.5.4 本研究的目的意义 | 第16-17页 |
| 第2章 副溶血弧菌突变菌的筛选以及鉴定 | 第17-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验细菌 | 第17页 |
| 2.1.2 实验用鱼 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 方法和步骤 | 第18-25页 |
| 2.2.1 细菌胞内存活实验方法 | 第18-19页 |
| 2.2.2 副溶血弧菌胞内存活突变体库的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.3 副溶血弧菌胞内存活缺失突变株的筛选 | 第20-21页 |
| 2.2.4 副溶血弧菌胞内存活缺失突变株的PCR | 第21-22页 |
| 2.2.5 副溶血弧菌胞内存活缺失突变株的Southern杂交鉴定 | 第22-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 头肾巨噬细胞的分离以及突变菌株的筛选 | 第25-26页 |
| 2.3.2 质粒pLOF的提取以及转化进入E.coli Sm10 | 第26页 |
| 2.3.3 副溶血弧菌胞内存活缺失突变株的PCR鉴定 | 第26-28页 |
| 2.3.4 胞内存活缺失突变株的Southern杂交鉴定 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 副溶血弧菌在巨噬细胞内存活相关基因的鉴定 | 第32-46页 |
| 3.1 材料和方法 | 第32页 |
| 3.1.1 实验菌体 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.2.2 Genome Walking PCR扩增突变序列 | 第33-36页 |
| 3.2.3 序列分析 | 第36页 |
| 3.3 结果 | 第36-44页 |
| 3.3.1 细菌基因组DNA的提取结果 | 第36-37页 |
| 3.3.2 Genome Walking PCR扩增结果 | 第37-38页 |
| 3.3.3 基因序列分析 | 第38-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第4章 副溶血弧菌胞内存活缺失突变株生物学特性研究 | 第46-55页 |
| 4.1 材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 试验细菌 | 第46页 |
| 4.1.2 实验用虾 | 第46页 |
| 4.1.3 实验试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 4.2 方法 | 第47-48页 |
| 4.2.1 生长曲线的测定 | 第47页 |
| 4.2.2 对运动能力的影响 | 第47页 |
| 4.2.3 生物膜形成测定 | 第47页 |
| 4.2.4 粘附实验 | 第47-48页 |
| 4.2.5 人工注射感染实验 | 第48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-53页 |
| 4.3.1 生长曲线 | 第48-50页 |
| 4.3.2 穿刺运动实验 | 第50页 |
| 4.3.3 生物膜形成 | 第50-51页 |
| 4.3.4 粘附实验 | 第51-53页 |
| 4.3.5 人工感染实验 | 第53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 小结与展望 | 第55-56页 |
| 5.1 小结 | 第55页 |
| 5.2 展望 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第64页 |
