| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第1章 引言 | 第7-9页 |
| 第2章 材料 | 第9-13页 |
| ·细胞株 | 第9页 |
| ·主要试剂 | 第9页 |
| ·自配试剂 | 第9-11页 |
| ·主要仪器设备 | 第11-13页 |
| 第3章 方法 | 第13-20页 |
| ·细胞培养 | 第13-14页 |
| ·细胞传代 | 第13页 |
| ·细胞冻存 | 第13页 |
| ·细胞复苏 | 第13-14页 |
| ·转染ROCK2-siRNA步骤(以六孔板为例) | 第14页 |
| ·MTT法检测各组细胞的增殖抑制情况 | 第14-15页 |
| ·细胞计数 | 第14页 |
| ·细胞种板 | 第14-15页 |
| ·MTT结晶 | 第15页 |
| ·DMSO显色 | 第15页 |
| ·吸光度测定 | 第15页 |
| ·利用紫外光照射仪造成细胞损伤模型 | 第15页 |
| ·流式细胞术分析细胞周期变化情况 | 第15-16页 |
| ·实验分组 | 第15-16页 |
| ·流式细胞分析的细胞准备流程 | 第16页 |
| ·Western blot检测Huh-7、HepG2细胞中的蛋白表达 | 第16-19页 |
| ·蛋白提取 | 第16页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第16-17页 |
| ·SDS—PAGE电泳 | 第17页 |
| ·转膜 | 第17-18页 |
| ·免疫反应 | 第18页 |
| ·化学发光,显影,定影 | 第18-19页 |
| ·凝胶图象分析 | 第19页 |
| ·Cdk2/Cyclin E激酶活性测定 | 第19页 |
| ·统计学分析 | 第19-20页 |
| 第4章 结果 | 第20-26页 |
| ·干扰ROCK2成功 | 第20页 |
| ·Rock2对肝癌细胞保护及细胞周期作用 | 第20-22页 |
| ·siRNA Rock2后对Huh-7、HepG2细胞生长的抑制作用 | 第20页 |
| ·各组Huh-7、HepG2细胞的生长曲线比较 | 第20-21页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期变化情况 | 第21-22页 |
| ·肝癌细胞DNA损伤后,周期蛋白Cdc25A表达变化 | 第22-24页 |
| ·肝癌细胞DNA损伤后,周期蛋白Cdk2活性的表达变化 | 第24-26页 |
| 第5章 讨论 | 第26-30页 |
| 第6章 结论 | 第30-31页 |
| 致谢 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第34-35页 |
| 综述 | 第35-39页 |
| 参考文献 | 第38-39页 |
