中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-11页 |
前言 | 第11-14页 |
研究现状、成果 | 第11-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
对象和方法 | 第14-34页 |
1.1 实验材料 | 第14-16页 |
1.1.1 细胞 | 第14页 |
1.1.2 主要试剂 | 第14-16页 |
1.1.3 主要仪器 | 第16页 |
1.2 实验方法 | 第16-33页 |
1.2.1 引物设计 | 第16-17页 |
1.2.2 序列合成 | 第17页 |
1.2.3 细胞复苏、细胞培养和细胞冻存 | 第17-19页 |
1.2.4 脂质体转染 | 第19-20页 |
1.2.5 双荧光素酶实验 | 第20-21页 |
1.2.6 miRNA RT-PCR | 第21-25页 |
1.2.7 mRNA RT-PCR | 第25-27页 |
1.2.8 Western blot | 第27-32页 |
1.2.9 MTT实验 | 第32页 |
1.2.10 平板克隆实验 | 第32页 |
1.2.11 流式细胞仪检测细胞周期 | 第32-33页 |
1.3 统计方法 | 第33-34页 |
结果 | 第34-43页 |
2.1 生物信息分析、双荧光素酶实验及转染确定Smaad 7 为miR-497靶点 | 第34-39页 |
2.1.1 生物信息分析确定Smad 7 为miR-497的靶点 | 第34页 |
2.1.2 MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系中双荧光素酶实验验证Smad 7 为miR-497的靶点 | 第34-35页 |
2.1.3 MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系中转染实验进一步验证Smad 7 为miR-497的靶点 | 第35-39页 |
2.2 miR-497对MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系增殖的影响 | 第39-41页 |
2.2.1 MTT法检测miR-497对MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系增殖活性的影响 | 第39-40页 |
2.2.2 平板克隆实验检测miR-497对MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系克隆形成能力的影响 | 第40-41页 |
2.3 流式细胞仪检测miR-497对MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系细胞周期的影响 | 第41-43页 |
讨论 | 第43-47页 |
3.1 miR-497通过靶向Smad 7 发挥生物学作用 | 第43-45页 |
3.2 miR-497对MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系增殖的影响 | 第45-46页 |
3.3 miR-497对MDA-MB -231乳腺癌细胞系和MCF- 7 乳腺癌细胞系细胞周期的影响 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第52-53页 |
综述 microRNA与肿瘤研究进展 | 第53-67页 |
综述参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67页 |