摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 绪论 | 第14-31页 |
1.1 细胞迁移的研究意义及现状 | 第14-17页 |
1.2 细胞趋化性迁移的研究现状 | 第17-20页 |
1.2.1 趋化性与细胞迁移 | 第17-18页 |
1.2.2 调节细胞趋化性的重要生物分子 | 第18-19页 |
1.2.2.1 PI3K、PIP3以及PIP3磷酸酶 | 第18页 |
1.2.2.2 小分子G蛋白(small GTPases) | 第18-19页 |
1.2.2.3 ATP及其它核苷酸 | 第19页 |
1.2.3 细胞趋化性机制的研究 | 第19-20页 |
1.3 电场对细胞作用机制的研究现状 | 第20-26页 |
1.3.1 内源性电场的发现、意义及其机理 | 第20-22页 |
1.3.2 外源性电场对细胞的生理学作用 | 第22页 |
1.3.3 细胞的趋电性迁移 | 第22页 |
1.3.4 影响细胞趋电性的因素 | 第22-26页 |
1.3.4.1 离子浓度 | 第23页 |
1.3.4.2 生长因子及其受体 | 第23-24页 |
1.3.4.3 蛋白激酶信号通路 | 第24-25页 |
1.3.4.4 膜电位与电压门控离子通道 | 第25-26页 |
1.3.4.5 细胞骨架 | 第26页 |
1.4 实验材料——盘基网柄菌 | 第26-29页 |
1.5 研究目的和意义 | 第29-30页 |
1.5.1 研究目的 | 第29页 |
1.5.2 研究意义 | 第29-30页 |
1.6 研究内容及方案 | 第30-31页 |
1.6.1 研究内容 | 第30页 |
1.6.2 研究方案 | 第30-31页 |
第2章 盘基网柄菌REMI突变库的构建 | 第31-43页 |
2.1 引言 | 第31-32页 |
2.2 实验试剂及配制 | 第32-33页 |
2.3 实验材料 | 第33页 |
2.4 实验仪器与设备 | 第33页 |
2.5 实验方法与步骤 | 第33-39页 |
2.5.1 盘基网柄菌细胞的无菌培养 | 第35页 |
2.5.2 盘基网柄菌细胞的冻存 | 第35页 |
2.5.3 克雷伯氏产气杆菌(Klebsiella aerogenes KA)的平板培养 | 第35-36页 |
2.5.4 克雷伯氏产气杆菌(Klebsiella aerogenes KA)的液体培养 | 第36页 |
2.5.5 克雷伯氏产气杆菌的储存 | 第36页 |
2.5.6 构建盘基网柄菌REMI突变库 | 第36-39页 |
2.5.6.1 pBRS-1 质粒的小量制备 | 第36-37页 |
2.5.6.2 质粒的酶切 | 第37页 |
2.5.6.3 线性质粒的纯化 | 第37页 |
2.5.6.4 线性质粒DNA纯化检测 | 第37-38页 |
2.5.6.5 盘基网柄菌的电转化 | 第38页 |
2.5.6.6 盘基网柄菌的有菌培养 | 第38-39页 |
2.5.6.7 盘基网柄菌单细胞纯化培养 | 第39页 |
2.6 实验结果 | 第39-42页 |
2.6.1 pBRS-1 质粒的酶切与纯化 | 第39-40页 |
2.6.2 电转化后加药筛选 | 第40-41页 |
2.6.3 盘基网柄菌突变株有菌培养 | 第41-42页 |
2.6.4 盘基网柄菌REMI突变库的构建 | 第42页 |
2.7 讨论 | 第42-43页 |
第3章盘基网柄菌发育缺陷突变株的筛选 | 第43-51页 |
3.1 引言 | 第43-44页 |
3.2 实验材料 | 第44页 |
3.3 实验试剂及配制 | 第44-45页 |
3.4 实验仪器与设备 | 第45页 |
3.5 实验方法 | 第45-46页 |
3.6 实验结果及分析 | 第46-49页 |
3.6.1 结果 | 第46页 |
3.6.2 分析 | 第46-49页 |
3.7 讨论 | 第49-51页 |
第4章 盘基网柄菌趋电性突变株的筛选 | 第51-57页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 盘基网柄菌细胞趋电性突变株的筛选 | 第51-56页 |
4.2.1 实验材料 | 第51-52页 |
4.2.2 实验试剂以及配制 | 第52页 |
4.2.3 趋电性实验仪器 | 第52页 |
4.2.4 实验方法与步骤 | 第52-55页 |
4.2.4.1 细胞的培养与预处理 | 第52-53页 |
4.2.4.2 细胞趋电性实验 | 第53-54页 |
4.2.4.3 数据处理 | 第54-55页 |
4.2.5.结果与分析 | 第55-56页 |
4.2.5.1 结果 | 第55页 |
4.2.5.2 分析 | 第55-56页 |
4.3 讨论 | 第56-57页 |
创新点、结论与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
附录A | 第70-83页 |
附录B | 第83-89页 |
附录C | 第89-92页 |
附录D | 第92-95页 |
附录E | 第95-102页 |
附录F | 第102-106页 |
攻读学位期间发表的论文和研究成果 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |