| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-28页 |
| 1.1 概述 | 第16页 |
| 1.2 植物防御昆虫的策略 | 第16-18页 |
| 1.2.1 物理策略防御昆虫 | 第17页 |
| 1.2.2 诱导因子策略防御昆虫 | 第17-18页 |
| 1.3 乳汁在植物防御中的重要性 | 第18-20页 |
| 1.3.1 植物乳汁成分 | 第18页 |
| 1.3.2 植物乳汁成分在防御昆虫的功能 | 第18-19页 |
| 1.3.3 桑树乳汁 | 第19-20页 |
| 1.4 蛋白酶抑制剂简介 | 第20-25页 |
| 1.4.1 蛋白酶抑制剂家族分类 | 第20-21页 |
| 1.4.2 植物丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPIs)超家族特征 | 第21页 |
| 1.4.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPIs)超家族特征 | 第21-22页 |
| 1.4.4 植物Phytocystatin家族特征 | 第22-23页 |
| 1.4.5 植物Phytocystatins功能 | 第23-24页 |
| 1.4.6 蛋白酶抑制剂在转基因植物中的研究进展 | 第24-25页 |
| 1.5 植物蛋白酶抑制剂在昆虫防御中的调控机制及作用机理 | 第25-28页 |
| 1.5.1 植物在受创伤、咬食后信号转导通路 | 第25-26页 |
| 1.5.2 植物蛋白酶抑制剂在昆虫防御中的作用机理及昆虫的应答 | 第26-28页 |
| 第二章 引言 | 第28-30页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第28页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第28-29页 |
| 2.3 研究路线 | 第29-30页 |
| 第三章 桑树Phytocystatin基因的克隆及生物信息学分析 | 第30-46页 |
| 3.1 材料与数据 | 第30-33页 |
| 3.1.1 材料 | 第30页 |
| 3.1.2 相关基因序列的获取 | 第30页 |
| 3.1.3 主要使用生物学软件 | 第30页 |
| 3.1.4 使用试剂及相关溶液配制方法 | 第30-33页 |
| 3.1.5 主要使用仪器 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-37页 |
| 3.2.1 桑树Phytocystatin家族相关基因的鉴定 | 第33页 |
| 3.2.2 粤桑幼苗的培养 | 第33-34页 |
| 3.2.3 RNA的提取与检测 | 第34页 |
| 3.2.4 cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
| 3.2.5 桑树Phytocystatin家族相关基因的克隆 | 第35-37页 |
| 3.2.6 桑树Phytocystatin家族基因系统发生分析、多序列比对和三级结构预测 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-44页 |
| 3.3.1 桑树Phytocystatin家族基因的特征 | 第37-38页 |
| 3.3.2 桑树Phytocystatin家族基因克隆及信息学分析 | 第38-43页 |
| 3.3.3 桑树Phytocystatin家族相关基因上游转录位点分析 | 第43-44页 |
| 3.4 总结与讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 桑树Phytocystatin基因表达分析 | 第46-54页 |
| 4.1 材料与数据 | 第46页 |
| 4.1.1 材料 | 第46页 |
| 4.1.2 主要使用试剂及相关溶液配制方法 | 第46页 |
| 4.1.3 主要使用仪器 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 RNA的提取及质量检测 | 第46页 |
| 4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第46页 |
| 4.2.3 内参引物Mn(a)GAPDH检测cDNA质量 | 第46-47页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-52页 |
| 4.3.1 川桑和粤桑各器官cDNA的制备及质量检测 | 第48-49页 |
| 4.3.2 Phytocystatin家族基因在川桑和粤桑器官表达分析 | 第49-50页 |
| 4.3.3 茉莉酸甲酯、创伤、咬食处理下桑树Phytocystatin家族基因在粤桑中表达分析 | 第50-52页 |
| 4.4 总结与讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 MaCPI-1亚细胞定位及蛋白水平的表达分析 | 第54-74页 |
| 5.1 材料与数据 | 第54-60页 |
| 5.1.1 材料 | 第54页 |
| 5.1.2 主要使用试剂及相关溶液配制方法 | 第54-60页 |
| 5.1.3 主要使用仪器 | 第60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60-68页 |
| 5.2.1 MaCPI-1亚细胞定位 | 第60-63页 |
| 5.2.2 MaCPI-1的原核表达和蛋白纯化 | 第63-66页 |
| 5.2.3 桑树蛋白质的提取 | 第66-67页 |
| 5.2.4 Western-blotting | 第67-68页 |
| 5.3 结果与分析 | 第68-72页 |
| 5.3.1 MaCPI-1亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 5.3.2 MaCPI-1的原核表达及蛋白纯化 | 第69-71页 |
| 5.3.3 粤桑叶片总蛋白提取及SDS-PAGE检测 | 第71页 |
| 5.3.4 Western-blotting结果检测 | 第71-72页 |
| 5.4 总结与讨论 | 第72-74页 |
| 第六章 综合与结论 | 第74-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-90页 |
| 在读期间发表文章及参研课题 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
