摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 杆状病毒概述 | 第9-11页 |
1.1.1 杆状病毒的基本特性 | 第9页 |
1.1.2 杆状病毒在昆虫宿主细胞中的复制 | 第9-10页 |
1.1.3 杆状病毒部分功能基因的研究进展 | 第10-11页 |
1.2 杆状病毒杀虫剂概述 | 第11页 |
1.3 重组杆状病毒的基因工程 | 第11-13页 |
1.3.1 缺失病毒非必需基因增加杀虫效果 | 第11-12页 |
1.3.2 插入外源基因提高杀虫速度 | 第12-13页 |
1.3.3 修饰病毒基因拓宽杀虫谱 | 第13页 |
1.4 生物毒素 | 第13-16页 |
1.4.1 蜘蛛毒素 | 第13-14页 |
1.4.2 蝎毒素 | 第14-16页 |
1.4.3 疥螨毒素 | 第16页 |
1.5 昆虫杆状病毒表达载体系统概述 | 第16-17页 |
1.6 研究设想及目的意义 | 第17-19页 |
第二章 三种毒素基因在昆虫细胞SF9中的表达及活性分析 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 试虫、载体、菌株及细胞系 | 第19页 |
2.1.2 试验中用到的试剂盒及生化试剂 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-24页 |
2.2.1 引物的设计 | 第19-20页 |
2.2.2 将Ar1b、Metx3、RjAa17f基因克隆到载体pFastBac-HTb | 第20-21页 |
2.2.3 重组穿梭载体的构建 | 第21-23页 |
2.2.4 Sf9细胞的培养及重组杆状病毒质粒的转染 | 第23页 |
2.2.5 BV的大量制备 | 第23页 |
2.2.6 蛋白质印迹(Western blot) | 第23-24页 |
2.2.7 三种不同神经毒素基因毒蛋白毒力及中肠电生理测定 | 第24页 |
2.3 结果 | 第24-29页 |
2.3.1 RjAa17f -T的酶切鉴定及测序分析 | 第24页 |
2.3.2 Ar1b-HTb、Metx3-HTb、RjAa17f -HTb的酶切鉴定 | 第24-25页 |
2.3.3 转化到DH10Bac菌株并对假阳性进行转座纯化的PCR鉴定 | 第25-26页 |
2.3.4 重组杆状病毒Bacmid的转染 | 第26-27页 |
2.3.5 蛋白质印迹(Western blot)检测三种神经毒素蛋白的表达 | 第27-28页 |
2.3.6 Ar1b、Metx3、RjAa17f毒蛋白毒力测定 | 第28页 |
2.3.7 Ar1b、Metx3、RjAa17f毒蛋白对棉铃虫中肠膜电位作用测定结果及分析 . 202.4 结论与讨论 | 第28-29页 |
2.4 结论与讨论 | 第29-31页 |
第三章 两种神经毒素重组病毒致死时间的测定 | 第31-34页 |
3.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.1.1 本实验研究基础 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32页 |
3.2.1 重组病毒的虫体扩繁与纯化 | 第32页 |
3.2.2 RjAa17f-HearNPV、Metx3-HearNPV LT50和LT90的测定 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-33页 |
3.3.1 RjAa17f-HearNPV、Metx3-HearNPV重组病毒LT50、LT90的测定 | 第32-33页 |
3.4 结论与讨论 | 第33-34页 |
第四章 结论与讨论 | 第34-36页 |
4.1 结论 | 第34页 |
4.2 讨论 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
作者简介 | 第42页 |