| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 第一章 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 亲免蛋白的性质与特点 | 第11-13页 |
| 1.2 亲免蛋白在植物中的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.3 CYP38在光合作用中的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 本工作的研究目的意义和内容 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究目的、意义 | 第19页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 pGEX4T.3-CYP38点突变以及pET28a-AtCtpA原核表达载体的构建 | 第21-37页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 pGEX4T.3-CYP38载体的构建 | 第22-27页 |
| 2.2.1.1 目的片段的制备 | 第22-24页 |
| 2.2.1.2 载体的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.1.3 pGEX4T.3-CYP38载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.2 构建pGEX4T.3-CYP38点突变 | 第27-31页 |
| 2.2.3 pET28a-AtCtpA载体的构建 | 第31-33页 |
| 2.2.3.1 目的基因的扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 pET28a质粒DNA的提取 | 第32页 |
| 2.2.3.3 目的基因与pET28a质粒DNA的双酶切 | 第32-33页 |
| 2.2.3.4 pET28a-AtCtpA载体的构建 | 第33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-37页 |
| 2.3.1 pGEX4T.3-CYP38重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.2 pGEX4T.3-CYP38点突变重组质粒的测序结果 | 第34-35页 |
| 2.3.3 pET28a-AtCtpA大肠杆菌DH5α菌落的PCR鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.4 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 CYP38各突变体与AtCtpA体外相互作用的研究 | 第37-49页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.1 材料 | 第37页 |
| 3.1.2 试剂 | 第37-38页 |
| 3.2 方法 | 第38-43页 |
| 3.2.1 GST蛋白及各种GST-CYP38融合蛋白的表达及纯化 | 第38-41页 |
| 3.2.1.1 蛋白表达 | 第38-39页 |
| 3.2.1.2 利用Glutathione Sepharose 4B微珠纯化蛋白 | 第39-41页 |
| 3.2.2 融合蛋白His-AtCtpA的表达与纯化 | 第41页 |
| 3.2.2.1 蛋白表达 | 第41页 |
| 3.2.2.2 利用Ni-NTAAgarose纯化蛋白 | 第41页 |
| 3.2.3 Pull-down实验 | 第41-43页 |
| 3.2.3.1 原理 | 第41-42页 |
| 3.2.3.2 Pull-down | 第42页 |
| 3.2.3.3 Western blotting检测 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-49页 |
| 3.3.1 GST tag融合蛋白及GST蛋白纯化结果 | 第43-44页 |
| 3.3.2 GST及GST融合蛋白浓度测定 | 第44-45页 |
| 3.3.3 His tag融合蛋白纯化结果 | 第45页 |
| 3.3.4 Pull-down结果 | 第45-47页 |
| 3.3.5 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 CYP38突变体与AtCtpA在酵母体内相互作用的研究 | 第49-60页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第49-50页 |
| 4.1.1 材料 | 第49页 |
| 4.1.2 试剂 | 第49-50页 |
| 4.2 方法 | 第50-54页 |
| 4.2.1 诱饵质粒的构建 | 第50-52页 |
| 4.2.1.1 目的基因的扩增 | 第50-51页 |
| 4.2.1.2 pGBKT7质粒DNA的提取 | 第51页 |
| 4.2.1.3 目的基因与pGBKT7质粒DNA的双酶切 | 第51-52页 |
| 4.2.1.4 诱饵质粒的构建 | 第52页 |
| 4.2.2 猎物质粒的构建 | 第52-53页 |
| 4.2.2.1 目的基因的扩增与双酶切 | 第52页 |
| 4.2.2.2 pGADT7质粒DNA的提取 | 第52-53页 |
| 4.2.2.3 pGADT7质粒DNA的双酶切 | 第53页 |
| 4.2.2.4 猎物质粒的构建 | 第53页 |
| 4.2.3 酵母双杂交 | 第53-54页 |
| 4.2.4 验证实验 | 第54页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第54-60页 |
| 4.3.1 诱饵质粒构建结果 | 第54-55页 |
| 4.3.2 猎物质粒的构建结果 | 第55页 |
| 4.3.3 酵母双杂交结果 | 第55-58页 |
| 4.3.4 验证实验结果 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录：英文缩写 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
