| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 能源利用现状 | 第9-10页 |
| 1.2 莱茵衣藻制氢的研究现状 | 第10-12页 |
| 1.2.1 莱茵衣藻产氢原理 | 第10-11页 |
| 1.2.2 莱茵衣藻“两步法”产氢 | 第11页 |
| 1.2.3 莱茵衣藻热激产氢 | 第11-12页 |
| 1.3 莱茵衣藻microRNA研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 莱茵衣藻D1蛋白研究进展 | 第13页 |
| 1.5 光诱导型的莱茵衣藻外源基因表达系统 | 第13-15页 |
| 1.5.1 现有莱茵衣藻的外源基因表达系统 | 第14页 |
| 1.5.2 光诱导型的基因 | 第14页 |
| 1.5.3 酵母中的光诱导型外源基因表达系统 | 第14-15页 |
| 1.6 研究内容的确立：莱茵衣藻光控系统的构建 | 第15-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-40页 |
| 2.1 实验藻株与质粒 | 第17页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第17-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-40页 |
| 2.3.1 莱茵衣藻的培养 | 第19-20页 |
| 2.3.2 靶向D1基因的amiRNA的设计 | 第20页 |
| 2.3.3 莱茵衣藻amiRNA表达载体骨架的构建 | 第20-21页 |
| 2.3.4 用PCR的方法得到基因片段 | 第21-27页 |
| 2.3.5 提取载体的质粒 | 第27-29页 |
| 2.3.6 用‘株磨法’转化载体至莱茵衣藻 | 第29页 |
| 2.3.7 筛选转化子 | 第29-32页 |
| 2.3.8 用qPCR检测amiRNA-D1的表达 | 第32-35页 |
| 2.3.9 用qPCR检测靶基因D1的表达 | 第35-38页 |
| 2.3.10 用GC-MS检测产氢量 | 第38-40页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第40-76页 |
| 3.1 靶向D1基因的amiRNA的设计 | 第40-42页 |
| 3.2 莱茵衣藻光控系统载体的成功构建 | 第42-53页 |
| 3.2.1 组成型载体改造 | 第42-45页 |
| 3.2.2 载体抗性改造 | 第45-46页 |
| 3.2.3 pDb124-GALBD-CIB1载体的成功构建 | 第46-48页 |
| 3.2.4 pDh124-VP64-CRY2-UAS-miRNA载体的成功构建 | 第48-51页 |
| 3.2.5 两个载体的转化 | 第51-53页 |
| 3.3 衣藻单克隆转化子的成功筛选 | 第53-62页 |
| 3.3.1 博来霉素抗生素筛选 | 第53-54页 |
| 3.3.2 PCR筛选到含pDb124-GAL4 BD-CIB1载体的转化子 | 第54-56页 |
| 3.3.3 潮霉素抗生素的筛选 | 第56-58页 |
| 3.3.4 PCR筛选到含pDh124-VP64-CRY2-UAS-miRNA载体的转化子 | 第58-60页 |
| 3.3.5 转化子产氢量初步检测 | 第60-62页 |
| 3.4 转化子amiRNA-D1转录水平检测 | 第62-66页 |
| 3.5 转化子靶基因D1表达水平检测 | 第66-69页 |
| 3.6 转化子产氢量的最终检测 | 第69-76页 |
| 第4章 讨论 | 第76-79页 |
| 4.1 通过调控D1蛋白来调控产氢存在的问题 | 第76-77页 |
| 4.2 使用人工amiRNA调控产氢的优劣 | 第77页 |
| 4.3 蓝光作为外源诱导条件的优劣 | 第77-79页 |
| 第5章 总结与展望 | 第79-81页 |
| 5.1 总结 | 第79-80页 |
| 5.2 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
