| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 第一章 研究背景 | 第11-27页 |
| 1.1 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV) | 第11-19页 |
| 1.1.1 乙型肝炎病毒概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 乙型肝炎病毒结构和基因组 | 第12-13页 |
| 1.1.3 乙型肝炎病毒的生活史 | 第13-15页 |
| 1.1.4 乙型肝炎病毒的基因转录调控 | 第15-17页 |
| 1.1.5 丁型肝炎病毒(Hepatitis Delta virus)概况 | 第17-19页 |
| 1.2 维甲类X受体(Retinoid X receptor) | 第19-27页 |
| 1.2.1 核受体(Nuclear receptor)概况 | 第19-20页 |
| 1.2.2 维甲类X受体及其异源二聚体伴侣 | 第20-21页 |
| 1.2.3 维甲类X受体形成的异源二聚体在肝脏中的作用 | 第21-25页 |
| 1.2.4 维甲类X受体的激动剂 | 第25-27页 |
| 第二章 立题依据及研究思路 | 第27-30页 |
| 第三章 实验材料和实验方法 | 第30-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-34页 |
| 3.1.0 细胞与细胞系 | 第30页 |
| 3.1.1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 3.1.2 分子克隆 | 第31页 |
| 3.1.3 蛋白电泳及Western Blot相关实验 | 第31-32页 |
| 3.1.4 免疫组化及免疫共沉淀 | 第32页 |
| 3.1.5 抗体 | 第32-33页 |
| 3.1.6 实时定量PCR (Real-time PCR) | 第33页 |
| 3.1.7 ELISA | 第33页 |
| 3.1.8 多肽 | 第33页 |
| 3.1.9 其它试剂 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-55页 |
| 3.2.1 分子生物学操作 | 第34-40页 |
| 3.2.2 细胞培养,转染以及稳定细胞株的建立 | 第40-43页 |
| 3.2.3 免疫印迹(Western Blot) | 第43-44页 |
| 3.2.4 蛋白表面生物素(Biotin)标记及免疫共沉淀 | 第44-45页 |
| 3.2.5 [~3H]牛磺胆酸盐([~3H]-taurocholate)摄取实验 | 第45-46页 |
| 3.2.6 从病人血清中超速离心纯化乙肝病毒 | 第46-47页 |
| 3.2.7 乙肝病毒(HBV)侵染PTH的实验方法 | 第47-48页 |
| 3.2.8 丁肝病毒(HDV)侵染PTH的实验方法 | 第48页 |
| 3.2.9 乙肝病毒的制备 | 第48页 |
| 3.2.10 HepG2-hNTCP细胞中HBV及HDV的感染 | 第48-49页 |
| 3.2.11 酶联免疫吸附检测(ELISA) | 第49页 |
| 3.2.12 免疫组化 | 第49-50页 |
| 3.2.13 RNA提取及反转录 | 第50-52页 |
| 3.2.14 实时定量PCR (RT-PCR)反应 | 第52-53页 |
| 3.2.15 RNA-seq | 第53页 |
| 3.2.16 细胞内总胆固醇测定 | 第53-54页 |
| 3.2.17 质谱分析 | 第54页 |
| 3.2.18 结果统计与分析 | 第54-55页 |
| 第四章 实验结果 | 第55-100页 |
| 4.1 贝莎罗汀活化维甲类X受体(RXR)能抑制HBV的早期感染 | 第55-67页 |
| 4.1.1 在HepG2-hNTCP细胞中,贝莎罗汀活化RXR抑制HBV病毒感染 | 第55-58页 |
| 4.1.2 在HepG2-hNTCP细胞中,HBV接种后加入贝莎罗汀基本不影响HBV感染 | 第58-62页 |
| 4.1.3 在树鼩原代肝细胞(PTH)中,贝莎罗汀活化维甲类X受体(RXR)能抑制HBV的早期感染 | 第62-65页 |
| 4.1.4 贝莎罗汀活化维甲类X受体(RXR)能抑制HDV的早期感染 | 第65-67页 |
| 4.2 siRNA降低维甲类X受体alpha (RXRα)的表达能促进HBV的早期感染 | 第67-76页 |
| 4.2.1 在HepG2-hNTCP细胞中,siRNA降低维甲类X受体alpha(RXRα)表达后接种HBV能促进病毒感染 | 第67-69页 |
| 4.2.2 在HepG2-hNTCP细胞中,接种HBV后siRNA降低维甲类X受体alpha (RXRα)的表达基本不影响HBV感染 | 第69-71页 |
| 4.2.3 在树鼩原代肝细胞(PTH)中,siRNA降低维甲类X受体alpha (RXRα)的表达能促进HBV的早期感染 | 第71-73页 |
| 4.2.4 在HepG2-hNTCP细胞中,siRNA降低维甲类X受体alpha(RXRα)的表达能促进HDV的早期感染 | 第73-75页 |
| 4.2.5 在树鼩原代肝细胞(PTH)中,siRNA降低维甲类X受体alpha (RXRα)的表达能促进HDV的早期感染 | 第75-76页 |
| 4.3 在Talen特异性敲除维甲类X受体alpha (RXRα)的HepG2-hNTCP细胞中,HBV和HDV的感染较正常细胞明显增强 | 第76-80页 |
| 4.3.1 构建针对人维甲类X受体alpha (RXRα)的TALEN系统 | 第77-78页 |
| 4.3.2 筛选人维甲类X受体alpha (RXRα)稳定敲除的单克隆细胞 | 第78-80页 |
| 4.4 人维甲类X受体alpha(RXRα)的异源二聚体伴侣蛋白对HBV感染的影响 | 第80-89页 |
| 4.4.1 法尼醇X受体(FXR)对HBV感染的影响 | 第80-84页 |
| 4.4.2 肝X受体alpha (LXRα)对HBV感染的负调控 | 第84-87页 |
| 4.4.3 下调肝X受体beta(LXRβ)、过氧化物酶体增殖物激活受体alpha(PPARα)和维甲酸受体alpha (RARα)的表达不影响HBV的感染 | 第87-89页 |
| 4.5 人维甲类X受体alpha(RXRα)对HBV受体NTCP表达的调节 | 第89-92页 |
| 4.6 脂质代谢对HBV及HDV感染的影响 | 第92-100页 |
| 4.6.1 胆酸合成通路对HBV感染的影响 | 第92-94页 |
| 4.6.2 胆固醇合成通路对HBV感染的影响 | 第94-97页 |
| 4.6.3 前列腺素合成途径对HBV感染的影响 | 第97-100页 |
| 第五章: 实验讨论 | 第100-108页 |
| 5.1 贝莎罗汀抑制HBV早期感染 | 第101-102页 |
| 5.2 降低RXRa的表达促进HBV早期感染 | 第102-103页 |
| 5.3 维甲类X受体alpha对NTCP表达的调控 | 第103页 |
| 5.4 RXRa异源二聚体伴侣蛋白对HBV感染的影响分析 | 第103-105页 |
| 5.5 维甲类X受体通过调节细胞内脂质代谢影响HBV感染 | 第105-108页 |
| 第六章 参考文献 | 第108-120页 |
| 附录一 主要实验仪器 | 第120-122页 |
| 附录二 缩写注释 | 第122-126页 |
| 附录三 实验所用引物序列 | 第126-128页 |
| 文章发表 | 第128页 |
| 学术会议 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129-133页 |
