| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 临床上已上市的激酶抑制剂所存在的问题 | 第14-18页 |
| 1.1.1 激酶抑制剂的毒副作用问题 | 第14-16页 |
| 1.1.2 激酶抑制剂的耐药性问题 | 第16-18页 |
| 1.2 针对激酶靶点的BaF3功能细胞库简介 | 第18-22页 |
| 1.2.1 针对激酶靶点的BaF3功能细胞的构建原理和方法 | 第18-20页 |
| 1.2.2 针对激酶靶点的BaF3功能细胞库的种类和目前的规模 | 第20-22页 |
| 1.2.3 针对激酶靶点的BaF3功能细胞库的特点和优势 | 第22页 |
| 1.3 高通量筛选BaF3功能细胞库对于开发新型选择性激酶小分子抑制剂的意义 | 第22-24页 |
| 第2章 针对c-KIT激酶靶点的选择性激酶抑制剂的发现和生物机制研究 | 第24-48页 |
| 2.1 研究背景 | 第24-26页 |
| 2.2 实验结果 | 第26-37页 |
| 2.2.1 CHMFL-110的发现 | 第26-28页 |
| 2.2.2 CHMFL-110体外酶活研究和选择性分析 | 第28-30页 |
| 2.2.3 CHMFL-110对c-KIT依赖性GIST细胞系的抗增殖作用研究 | 第30-32页 |
| 2.2.4 对CHMFL-110与c-KIT激酶蛋白的结合模式的研究 | 第32-33页 |
| 2.2.5 CHMFL-110对GIST细胞系信号通路和细胞周期的影响 | 第33-35页 |
| 2.2.6 CHMFL-110的药物代谢动力学研究和对皮下移植瘤小鼠模型的抗肿瘤活性研究 | 第35-37页 |
| 2.3 结果分析与讨论 | 第37-38页 |
| 2.4 实验材料和方法 | 第38-48页 |
| 2.4.1 细胞系 | 第38页 |
| 2.4.2 主要试剂和仪器 | 第38-41页 |
| 2.4.3 化学合成路线 | 第41页 |
| 2.4.4 CHMFL-110与c-KIT和ABL激酶的分子对接 | 第41页 |
| 2.4.5 蛋白样品的制备 | 第41-43页 |
| 2.4.6 CHMFL-110对信号通路的影响 | 第43页 |
| 2.4.7 体外激酶生化测试 | 第43-44页 |
| 2.4.8 BaF3功能细胞的构建 | 第44页 |
| 2.4.9 化合物与激酶亲和能力(Kd)及其激酶谱选择性评价实验(KINOMEscan~(TM)) | 第44-45页 |
| 2.4.10 细胞凋亡实验 | 第45页 |
| 2.4.11 细胞周期实验 | 第45页 |
| 2.4.12 CHMFL-110对细胞增殖的影响 | 第45页 |
| 2.4.13 大鼠体内药代动力学实验 | 第45-46页 |
| 2.4.14 Balb/c-nu小鼠移植瘤模型实验 | 第46页 |
| 2.4.15 免疫组织化学 | 第46-48页 |
| 第3章 针对Bcr-Abl激酶靶点的新型激酶抑制剂的发现和生物机制研究 | 第48-77页 |
| 3.1 研究背景 | 第48-50页 |
| 3.2 实验结果 | 第50-69页 |
| 3.2.1 CHMFL-074和CHMFL-155的发现 | 第50-52页 |
| 3.2.2 CHMFL-074体外酶活研究和选择性分析 | 第52-54页 |
| 3.2.3 CHMFL-074与ABL1结合模式的研究 | 第54-55页 |
| 3.2.4 CHMFL-074对Bcr-Abl依赖性CML细胞系和Bcr-Abl阳性病人原代细胞的抗增殖作用研究 | 第55-57页 |
| 3.2.5 CHMFL-074对CML细胞系信号通路和细胞周期的影响 | 第57-59页 |
| 3.2.6 CHMFL-074对皮下移植瘤小鼠模型的抗肿瘤活性 | 第59-61页 |
| 3.2.7 CHMFL-155的体外酶活研究和选择性分析 | 第61-63页 |
| 3.2.8 CHMFL-155与ABL1和c-KIT结合模式的研究 | 第63页 |
| 3.2.9 CHMFL-155对Bcr-Abl依赖性CML细胞系和c-KIT依赖性GIST细胞系的抗增殖作用研究 | 第63-64页 |
| 3.2.10 CHMFL-155对CML细胞系和GIST细胞系信号通路和细胞周期的影响 | 第64-67页 |
| 3.2.11 CHMFL-155的药物代谢动力学研究和对皮下移植瘤小鼠模型的抗肿瘤活性研究 | 第67-69页 |
| 3.3 结果分析与讨论 | 第69-70页 |
| 3.4 实验材料和方法 | 第70-77页 |
| 3.4.1 细胞系 | 第70页 |
| 3.4.2 主要试剂和仪器 | 第70-71页 |
| 3.4.3 化学合成路线 | 第71-72页 |
| 3.4.4 共结晶和结构解析 | 第72-73页 |
| 3.4.5 体外激酶生化测试 | 第73-74页 |
| 3.4.6 BaF3功能细胞的构建 | 第74页 |
| 3.4.7 抗增殖活性的测定 | 第74-75页 |
| 3.4.8 克隆集落实验 | 第75页 |
| 3.4.9 信号通路影响的测定 | 第75页 |
| 3.4.10 细胞凋亡实验 | 第75页 |
| 3.4.11 细胞周期实验 | 第75-76页 |
| 3.4.12 病人原代细胞的纯化 | 第76页 |
| 3.4.13 CML病人原代细胞抗增殖活性的检测 | 第76-77页 |
| 第4章 针对PDGFRα激酶靶点的选择性激酶抑制剂的发现和生物机制研究 | 第77-94页 |
| 4.1 研究背景 | 第77-79页 |
| 4.2 实验结果 | 第79-87页 |
| 4.2.1 CHMFL-159的发现 | 第79-81页 |
| 4.2.2 CHMFL-159的体外酶活研究和选择性分析 | 第81-82页 |
| 4.2.3 CHMFL-159与PDGFRα结合模式的研究 | 第82-83页 |
| 4.2.4 CHMFL-159对PDGFRα依赖性和高表达性癌细胞系的抗增殖作用 | 第83-84页 |
| 4.2.5 CHMFL-159对PDGFRα信号通路的影响 | 第84-85页 |
| 4.2.6 CHMFL-159对PDGFRα依赖性和高表达性癌细胞系细胞凋亡的影响 | 第85-86页 |
| 4.2.7 CHMFL-159的药物代谢动力学研究和对皮下移植瘤小鼠模型的抗肿瘤活性研究 | 第86-87页 |
| 4.3 结果分析与讨论 | 第87-88页 |
| 4.4 实验材料和方法 | 第88-94页 |
| 4.4.1 细胞系 | 第88-89页 |
| 4.4.2 主要试剂和仪器 | 第89页 |
| 4.4.3 化学合成路线 | 第89-90页 |
| 4.4.4 PDGFRα的蛋白纯化 | 第90页 |
| 4.4.5 共结晶及结构解析 | 第90-92页 |
| 4.4.6 体外激酶生化测试 | 第92页 |
| 4.4.7 BaF3功能细胞的构建 | 第92页 |
| 4.4.8 抗增殖活性的测定 | 第92-93页 |
| 4.4.9 信号通路影响的测定 | 第93页 |
| 4.4.10 细胞凋亡实验 | 第93-94页 |
| 第5章 针对STK16激酶靶点的选择性激酶抑制剂的发现和生物机制研究 | 第94-117页 |
| 5.1 研究背景 | 第94-95页 |
| 5.2 实验结果 | 第95-110页 |
| 5.2.1 STK16-IN-1的体外酶活研究和选择性分析 | 第95-98页 |
| 5.2.2 对STK16-IN-1与STK16激酶结合机制的研究 | 第98-99页 |
| 5.2.3 STK16-IN-1在肿瘤细胞内对STK16的抑制活性研究 | 第99-101页 |
| 5.2.4 对STK16相关细胞内信号通路的作用机制探讨 | 第101-102页 |
| 5.2.5 对STK16协同抗增殖作用的探讨 | 第102-104页 |
| 5.2.6 STK16在细胞有丝分裂中的作用 | 第104-110页 |
| 5.3 结果分析与讨论 | 第110-111页 |
| 5.4 实验材料和方法 | 第111-117页 |
| 5.4.1 细胞系 | 第111页 |
| 5.4.2 主要试剂和仪器 | 第111-112页 |
| 5.4.3 化学合成路线 | 第112-113页 |
| 5.4.4 STK16,4EBP1和DGR1的蛋白纯化 | 第113页 |
| 5.4.5 体外激酶生化测试 | 第113-114页 |
| 5.4.6 ATP竞争性实验 | 第114页 |
| 5.4.7 STK16-IN-1与STK16激酶的分子对接 | 第114页 |
| 5.4.8 Hela-STK16-GFP-Flag稳转细胞系的构建 | 第114-115页 |
| 5.4.9 STK16的RNA干扰实验 | 第115页 |
| 5.4.10 免疫共沉淀实验 | 第115页 |
| 5.4.11 免疫荧光染色 | 第115页 |
| 5.4.12 抗增殖活性的测定 | 第115-116页 |
| 5.4.13 信号通路影响的测定 | 第116页 |
| 5.4.14 细胞凋亡实验和细胞周期分布实验 | 第116页 |
| 5.4.15 药物组合实验 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第124-125页 |
