| 中文摘要 | 第16-18页 |
| ABSTRACT | 第18-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-29页 |
| 1.1 PCBs | 第21-24页 |
| 1.1.1 PCBs概述 | 第21页 |
| 1.1.2 PCBs的特性 | 第21-23页 |
| 1.1.3 PCB126简介 | 第23页 |
| 1.1.4 PCB126与肝癌 | 第23-24页 |
| 1.2 上皮间充质转化 | 第24-25页 |
| 1.2.1 上皮间充质转化简介 | 第24-25页 |
| 1.2.2 EMT的分子基础 | 第25页 |
| 1.3 PKM2概述 | 第25-26页 |
| 1.3.1 PKM2与肝癌 | 第25-26页 |
| 1.3.2 PKM2与STAT3/Snail1信号通路 | 第26页 |
| 1.4 AhR | 第26-27页 |
| 1.4.1 AhR与ER | 第26-27页 |
| 1.4.2 AhR与活性氧 | 第27页 |
| 1.5 有氧糖酵解 | 第27-28页 |
| 1.5.1 有氧糖酵解简介 | 第27-28页 |
| 1.5.2 有氧糖酵解相关蛋白 | 第28页 |
| 1.6 课题研究目的及意义 | 第28-29页 |
| 第二章 PCB126诱导肝癌细胞发生上皮间充质转化 | 第29-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第29页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第29页 |
| 2.2.2 细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.2.3 药物配制 | 第30页 |
| 2.2.4 细胞总RNA提取 | 第30页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 2.2.6 MTT法检测细胞存活率 | 第31页 |
| 2.2.7 细胞粘附实验 | 第31页 |
| 2.2.8 细胞形态学观察 | 第31页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-34页 |
| 2.3.1 PCB126暴露促进人肝癌细胞Bel-7402 和SMMC-7721 上皮间充质转化 | 第31-32页 |
| 2.3.2 PCB126暴露改变人肝癌细胞Bel-7402 和SMMC-7721 的形态和粘附能力 | 第32-33页 |
| 2.3.3 PCB126暴露对人肝癌细胞Bel-7402 和SMMC-7721 存活率的影响 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 PCB126通过PKM2激活STAT3/Snail1信号通路从而促进肝癌细胞发生上皮间充质转化 | 第35-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第35页 |
| 3.2.2 细胞的培养 | 第35页 |
| 3.2.3 药物配置 | 第35-36页 |
| 3.2.4 细胞总RNA的提取 | 第36页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR | 第36页 |
| 3.2.6 细胞蛋白提取 | 第36页 |
| 3.2.7 Western印迹 | 第36-37页 |
| 3.2.8 RNA干扰实验 | 第37页 |
| 3.2.9 统计学分析 | 第37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-41页 |
| 3.3.1 PCB126通过激活STAT3/Snail1信号通路促进肝癌细胞的上皮间充质转化 | 第37-39页 |
| 3.3.2 PCB126暴露提高PKM2的表达和核转移 | 第39-40页 |
| 3.3.3 PKM2在PCB126激活的STAT3/Snail1信号通路和促进上皮间充质转化中扮演重要角色 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 PCB126通过芳香烃受体途径调节PKM2/STAT3/ Snail1信号通路进而促进肝癌细胞上皮间充质转化 | 第43-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第43页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 4.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第43页 |
| 4.2.2 细胞的培养 | 第43页 |
| 4.2.3 药物配制 | 第43页 |
| 4.2.4 ROS 水平检测 | 第43-44页 |
| 4.2.5 细胞总RNA的提取 | 第44页 |
| 4.2.6 荧光定量PCR | 第44页 |
| 4.2.7 细胞蛋白提取 | 第44页 |
| 4.2.8 Western印迹 | 第44页 |
| 4.2.9 RNA干扰实验 | 第44页 |
| 4.2.10 统计学分析 | 第44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-48页 |
| 4.3.1 AhR在PCB126诱导的肝癌细胞上皮间充质转化中扮演重要作用 | 第44页 |
| 4.3.2 PCB126通过AhR途径激活PKM2/STAT3/Snail1信号通路 | 第44-46页 |
| 4.3.3 AhR通过调控ROS进而促进上皮间充质转化 | 第46-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 PCB126通过ER调节PKM2/STAT3/Snail1信号通路从而促进细胞上皮间充质转化 | 第50-53页 |
| 5.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第50页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第50页 |
| 5.2.2 细胞的培养 | 第50页 |
| 5.2.3 药物配制 | 第50页 |
| 5.2.4 细胞总RNA的提取 | 第50页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR | 第50页 |
| 5.2.6 细胞蛋白提取 | 第50页 |
| 5.2.7 Western印迹 | 第50-51页 |
| 5.2.8 RNA干扰实验 | 第51页 |
| 5.2.9 统计学分析 | 第51页 |
| 5.3 实验结果 | 第51页 |
| 5.3.1 PCB126通过ER调节上皮间充质转化和PKM2/STAT3/Snail1信号通路 | 第51页 |
| 5.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第六章 PCB126对肝癌细胞SMMC-7721 有氧糖酵解的影响 | 第53-57页 |
| 6.1 实验材料 | 第53页 |
| 6.1.1 细胞株 | 第53页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第53页 |
| 6.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 6.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第53页 |
| 6.2.2 细胞的培养 | 第53页 |
| 6.2.3 药物配制 | 第53页 |
| 6.2.4 葡萄糖和乳酸检测 | 第53页 |
| 6.2.5 细胞总RNA的提取 | 第53页 |
| 6.2.6 荧光定量PCR | 第53-54页 |
| 6.2.7 RNA干扰实验 | 第54页 |
| 6.2.8 统计学分析 | 第54页 |
| 6.3 结果 | 第54-55页 |
| 6.3.1 PCB126暴露促进肝癌细胞SMMC-7721 有氧糖酵解 | 第54-55页 |
| 6.3.2 敲减PKM2对PCB126诱导的有氧糖酵解的影响 | 第55页 |
| 6.4 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录1 主要试剂配方 | 第66-68页 |
| 附录2 实验主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 附录3 英文缩略语表 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简况及联系方式 | 第72-73页 |
