摘要 | 第3-10页 |
ABSTRACT | 第10-18页 |
前言 | 第22-31页 |
第一章 尿exosomes提取方法的优化 | 第31-42页 |
1 方法 | 第31-35页 |
1.1 材料、试剂与仪器 | 第31-32页 |
1.2 健康志愿者 | 第32页 |
1.3 超速离心法提取尿exosomes | 第32-34页 |
1.4 纳米膜浓缩法提取尿exosomes | 第34-35页 |
1.5 透射电子显微镜观察扫描 | 第35页 |
2 结果 | 第35-39页 |
2.1 尿exosomes的鉴定 | 第35-38页 |
2.2 两种尿exosomes提取方法的比较 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-42页 |
第二章 尿液exosome标本收集方法的优化 | 第42-53页 |
1 方法 | 第42-46页 |
1.1 材料、试剂与仪器 | 第42-44页 |
1.2 参与者 | 第44页 |
1.3 样本处理 | 第44-45页 |
1.4 凝胶电泳SDS-PAGE | 第45页 |
1.5 银染 | 第45页 |
1.6 Western blot检测TSG101 | 第45-46页 |
2 结果 | 第46-50页 |
2.1 Bradford法蛋白浓度测定 | 第46-47页 |
2.2 添加蛋白酶抑制剂组聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝色 | 第47-49页 |
2.3 不添加蛋白酶抑制剂组银染 | 第49-50页 |
2.4 Western blot检测TSG101 | 第50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
第三章 尿exosomes提取技术在糖尿病肾病研究中的应用 | 第53-71页 |
1 方法 | 第54-62页 |
1.1 实验设计 | 第54-57页 |
1.2 材料、试剂与仪器 | 第57-58页 |
1.3 参与者 | 第58-59页 |
1.4 样本处理 | 第59-60页 |
1.5 凝胶电泳SDS-PAGE | 第60-61页 |
1.6 Western blot检测TSG101 | 第61-62页 |
2 结果 | 第62-68页 |
2.1 NanoSight观察到的exosomes的形态和数量 | 第62-65页 |
2.2 蛋白浓度比较 | 第65-66页 |
2.3 各组混合样品蛋白模式图 | 第66-68页 |
3 讨论 | 第68-71页 |
第四章 蛋白组学技术用于寻找糖尿病肾病尿exosomes中的生物标记物 | 第71-92页 |
1 方法 | 第71-81页 |
1.1 材料、试剂与仪器 | 第71-74页 |
1.2 参与者 | 第74页 |
1.3 样本处理 | 第74-77页 |
1.4 双向凝胶电泳 | 第77页 |
1.5 分析胶的成像及图像分析 | 第77-78页 |
1.6 制备胶的制作及处理 | 第78-79页 |
1.7 质谱鉴定前的处理 | 第79-80页 |
1.8 质谱鉴定 | 第80页 |
1.9 生物信息学分析 | 第80-81页 |
2 结果 | 第81-88页 |
2.1 分析胶蛋白成像 | 第81-83页 |
2.2 质谱鉴定发现的差异蛋白 | 第83-84页 |
2.3 生物信息学分析 | 第84-88页 |
3 讨论 | 第88-92页 |
参考文献 | 第92-106页 |
全文总结 | 第106-108页 |
成果 | 第108-109页 |
附录1 英文缩略词对照表 | 第109-112页 |
附录2 发表论文 | 第112-165页 |
致谢 | 第165-167页 |
统计学证明 | 第167页 |