| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 果蝇在生物学领域是重要的模式生物 | 第12-13页 |
| 1.1.1 果蝇的研究历史 | 第12页 |
| 1.1.2 果蝇的生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 果蝇的特殊优势 | 第13页 |
| 1.2 建立转基因果蝇 | 第13-15页 |
| 1.2.1 胚胎显微注射 | 第14页 |
| 1.2.2 UAS/Gal4系统在果蝇转基因中的原理及应用 | 第14-15页 |
| 1.3 沃尔巴克氏体(Wolbachia)的研究情况及其与宿主CI关系 | 第15-23页 |
| 1.3.1 Wolbachia的生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.3.2 Wolbachia的传播方式 | 第16-17页 |
| 1.3.3 Wolbachia与宿主的相互作用 | 第17-19页 |
| 1.3.4 Wolbachia诱导的精卵细胞质不亲和(CI) | 第19-21页 |
| 1.3.5 Wolbachia在生物防治方面的运用 | 第21-23页 |
| 1.4 本课题研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第25-41页 |
| 2.1 实验试剂、材料和设备 | 第25-27页 |
| 2.1.1 实验主要试剂及来源 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验果蝇来源及饲养 | 第26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 Dmel wMel果蝇基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 引物的设计 | 第28页 |
| 2.2.3 目的基因PCR扩增 | 第28-30页 |
| 2.2.4 PCR产物的纯化回收 | 第30页 |
| 2.2.5 PCR产物与pEASY-T1载体连接、转化 | 第30-31页 |
| 2.2.6 目的基因与pUAST表达载体连接 | 第31-33页 |
| 2.2.7 大量提取纯化转座酶质粒p△2-3及质粒pUAST-WD0631 | 第33-34页 |
| 2.2.8 果蝇胚胎显微注射 | 第34-36页 |
| 2.2.9 转基因位点的确定及纯合体构建 | 第36-38页 |
| 2.2.10 检测实验用果蝇Wolbachia感染情况 | 第38页 |
| 2.2.11 果蝇RNA提取 | 第38-39页 |
| 2.2.12 cDNA第一条链的合成 | 第39页 |
| 2.2.13 荧光定量检测目的基因过表达 | 第39-40页 |
| 2.2.14 转基因果蝇产卵量及胚胎孵化率检测 | 第40-41页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第41-48页 |
| 3.1 WD0631和WD0632 CDS全长的扩增 | 第41页 |
| 3.2 WD0631和WD0632基因的克隆 | 第41-43页 |
| 3.3 pUAST-WD0631重组质粒的获得 | 第43页 |
| 3.4 WD0631转基因果蝇的获得 | 第43-44页 |
| 3.5 实验用果蝇Wolbachia感染检测 | 第44-45页 |
| 3.6 nosGal4和bamGal4驱动WD0631转基因果蝇在雄性果蝇中过表达 | 第45-46页 |
| 3.7 转基因果蝇WD0631过表达后代产卵量和胚胎孵化率统计 | 第46-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 果蝇胚胎显微注射 | 第48-49页 |
| 4.2 Wolbachia基因WD0631与果蝇CI表型产生的关系 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-62页 |
| 硕士研究生期间论文发表情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
