| 缩略词 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 细胞模型 | 第10-12页 |
| 1.1.1 原代肝细胞模型 | 第10-11页 |
| 1.1.2 细胞系模型 | 第11-12页 |
| 1.2 动物模型 | 第12-16页 |
| 1.2.1 非人灵长类模型 | 第12-13页 |
| 1.2.2 小鼠模型 | 第13-14页 |
| 1.2.3 其他模型 | 第14-16页 |
| 1.3 本研究的目的、意义和主要研究内容 | 第16-17页 |
| 1.3.1 本研究的目的、意义 | 第16页 |
| 1.3.2 本研究主要研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-44页 |
| 2.1 试验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 获取HBV血清 | 第17页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.3 引物和基因合成、质粒、感受态细胞 | 第17页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第17-18页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.6 试剂盒 | 第18-19页 |
| 2.1.7 主要试剂及配制 | 第19-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-44页 |
| 2.2.1 人NTCP慢病毒载体构建及慢病毒包装 | 第22-29页 |
| 2.2.2 人NTCP介导HBV感染HepG2细胞和Huh7细胞 | 第29-34页 |
| 2.2.3 食蟹猴原代肝细胞的分离与原代培养 | 第34-35页 |
| 2.2.4 人NTCP介导HBV感染食蟹猴原代肝细胞 | 第35-36页 |
| 2.2.5 靶向食蟹猴NTCP的gRNA活性筛选及相关慢病毒包装 | 第36-41页 |
| 2.2.6 人NTCP介导HBV感染食蟹猴NTCP敲除的原代肝细胞 | 第41-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-60页 |
| 3.1 人NTCP慢病毒载体构建及慢病毒包装 | 第44-47页 |
| 3.1.1 人NTCP慢病毒载体构建 | 第44-45页 |
| 3.1.2 pLKO.1-hNTCP慢病毒包装 | 第45-47页 |
| 3.2 人NTCP介导HBV感染HepG2细胞和Huh7细胞 | 第47-51页 |
| 3.2.1 人NTCP介导HBV感染HepG2细胞 | 第47-49页 |
| 3.2.2 人NTCP介导HBV感染Huh7细胞 | 第49-51页 |
| 3.3 食蟹猴原代肝细胞的分离与原代培养 | 第51-53页 |
| 3.4 人NTCP介导HBV感染食蟹猴原代肝细胞 | 第53-54页 |
| 3.5 靶向食蟹猴NTCP的gRNA活性筛选及相关慢病毒包装 | 第54-57页 |
| 3.5.1 NTCP靶点gRNA活性筛选 | 第54-55页 |
| 3.5.2 pLV hUbC-Cas9-T2A-GFP-U6-gRNAx慢病毒载体构建 | 第55-56页 |
| 3.5.3 pLV hUbC-Cas9-T2A-GFP-U6-gRNAx慢病毒包装 | 第56-57页 |
| 3.6 人NTCP介导HBV感染食蟹猴NTCP敲除的原代肝细胞 | 第57-60页 |
| 3.6.1 CRISPR/Cas9系统敲除食蟹猴NTCP基因 | 第57-58页 |
| 3.6.2 病毒感染食蟹猴NTCP敲除的原代肝细胞 | 第58-60页 |
| 第四章 讨论 | 第60-63页 |
| 4.1 慢病毒载体包装与感染 | 第60页 |
| 4.2 食蟹猴原代肝细胞分离与培养 | 第60-61页 |
| 4.3 人NTCP介导HBV感染 | 第61-63页 |
| 第五章 总结 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
