| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 土壤盐碱化概况 | 第11页 |
| 1.2 盐胁迫对植物的影响 | 第11-13页 |
| 1.2.1 抑制组织器官生长 | 第11页 |
| 1.2.2 离子毒害 | 第11-12页 |
| 1.2.3 活性氧伤害 | 第12-13页 |
| 1.2.4 抑制光合作用 | 第13页 |
| 1.2.5 干扰正常呼吸作用 | 第13页 |
| 1.2.6 营养离子吸收不平衡 | 第13页 |
| 1.3 植物耐盐机制的研究 | 第13-15页 |
| 1.3.1 作物拒盐机制 | 第13-14页 |
| 1.3.2 作物耐盐机制 | 第14-15页 |
| 1.4 植物K离子转运蛋白研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 转录因子NAC的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.6 RACE原理 | 第17-18页 |
| 1.6.1 SMARTTM 3'-RACE的原理 | 第17页 |
| 1.6.2 SMARTTM 5'-RACE的原理 | 第17-18页 |
| 1.7 农杆菌介导法 | 第18-19页 |
| 1.8 花粉管通道法 | 第19页 |
| 1.9 表达载体的构建 | 第19-20页 |
| 1.9.1 启动子 | 第19页 |
| 1.9.2 选择标记基因 | 第19-20页 |
| 1.10 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 AsKUP1基因全长的克隆与功能鉴定 | 第21-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 植物的培养 | 第21页 |
| 2.2.2 RNA的提取和检测 | 第21-22页 |
| 2.2.3 基因的5'-RACE | 第22-25页 |
| 2.2.4 PCR产物的回收 | 第25页 |
| 2.2.5 PCR产物的连接 | 第25页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第25-26页 |
| 2.2.7 重组质粒的鉴定及测序 | 第26页 |
| 2.2.8 克隆AsKUP1的全长序列 | 第26页 |
| 2.2.9 过表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.10 农杆菌遗传转化拟南芥 | 第27-28页 |
| 2.2.11 阳性转基因植物的筛选及观察 | 第28页 |
| 2.2.12 盐胁迫下转基因种子萌发率及植株根长、鲜重和干重测定 | 第28页 |
| 2.2.13 转基因植株Na~+、K~+含量的测定 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-42页 |
| 2.3.1 AsKUP1基因的克隆 | 第29-30页 |
| 2.3.2 测序拼接后AsKUP1基因全长 | 第30-32页 |
| 2.3.3 AsKUP1所编码的氨基酸序列 | 第32页 |
| 2.3.4 AsKUP1基因生物信息学分析 | 第32-36页 |
| 2.3.5 转基因拟南芥耐盐性分析 | 第36-42页 |
| 3 AsNAC1基因的克隆及功能分析 | 第42-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 植物的培养 | 第42页 |
| 3.2.2 RNA的提取和检测 | 第42页 |
| 3.2.3 第一链cDNA合成 | 第42页 |
| 3.2.4 过表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.5 农杆菌遗传转化拟南芥 | 第43页 |
| 3.2.6 阳性转基因植物的筛选及观察 | 第43页 |
| 3.2.7 盐胁迫下转基因种子萌发率及植株根长、鲜重和干重测定 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-53页 |
| 3.3.1 AsNAC1基因全长序列分析 | 第44-45页 |
| 3.3.2 AsNAC1所编码的氨基酸序列 | 第45页 |
| 3.3.3 AsNAC1基因生物信息学分析 | 第45-48页 |
| 3.3.4 转基因拟南芥耐盐性分析 | 第48-53页 |
| 4 结论与讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 讨论 | 第53-54页 |
| 4.2 结论 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
