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D97N突变对光受体蛋白古紫质-4质子泵和能量转换效率的影响

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第11-23页
    1.1 aR4的拓扑结构和功能第11-13页
    1.2 aR4与bR光循环和质子传输第13-17页
    1.3 aR4与bR质子传输过程中关键残基第17-18页
    1.4 光能转化系统第18-19页
    1.5 蛋白表达系统第19-20页
    1.6 研究方法第20-21页
    1.7 本工作研究内容及意义第21-23页
第二章 突变体的构建第23-31页
    2.1 突变体的制备第23-25页
        2.1.1 重叠延伸PCR引物设计第23页
        2.1.2 表达载体的构建第23-24页
        2.1.3 嗜盐菌转化第24页
        2.1.4 蛋白的表达与纯化第24-25页
    2.2 结果与讨论第25-29页
        2.2.1 突变体基因序列的鉴定第25-27页
        2.2.2 蛋白分子量检测第27页
        2.2.3 紫外-可见光谱测定第27-29页
        2.2.4 蛋白功能活性测定第29页
    2.3 本章小结第29-31页
第三章 D97N突变对aR4光循环的影响第31-50页
    3.1 样品准备第31-33页
    3.2 实验方法第33-35页
        3.2.1 光循环中间态测定第33页
        3.2.2 固体核磁共振第33-34页
        3.2.3 D85/D86的pKa滴定第34-35页
        3.2.4 傅里叶红外光谱第35页
    3.3 结果与讨论第35-49页
        3.3.1 光循环中间态测定第35-39页
        3.3.2 D97突变对视黄醛结合口袋的影响第39-42页
        3.3.3 D97突变对质子受体D86的影响第42-44页
        3.3.4 D97突变对蛋白构象的影响第44-49页
    3.4 本章小结第49-50页
第四章 D97N突变对aR4三聚结构和能量转换效率的影响第50-55页
    4.1 样品准备第50页
    4.2 实验方法第50-51页
        4.2.1 蛋白聚集状态测定第50页
        4.2.2 ATP生成率的测定第50-51页
    4.3 结果与讨论第51-53页
        4.3.1 蛋白聚集状态测定第51-52页
        4.3.2 菌株ATP生成率的测定第52-53页
    4.4 本章小结第53-55页
第五章 总结与展望第55-57页
参考文献第57-65页
硕士期间发表论文第65-66页
致谢第66-67页

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