摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
1.1 aR4的拓扑结构和功能 | 第11-13页 |
1.2 aR4与bR光循环和质子传输 | 第13-17页 |
1.3 aR4与bR质子传输过程中关键残基 | 第17-18页 |
1.4 光能转化系统 | 第18-19页 |
1.5 蛋白表达系统 | 第19-20页 |
1.6 研究方法 | 第20-21页 |
1.7 本工作研究内容及意义 | 第21-23页 |
第二章 突变体的构建 | 第23-31页 |
2.1 突变体的制备 | 第23-25页 |
2.1.1 重叠延伸PCR引物设计 | 第23页 |
2.1.2 表达载体的构建 | 第23-24页 |
2.1.3 嗜盐菌转化 | 第24页 |
2.1.4 蛋白的表达与纯化 | 第24-25页 |
2.2 结果与讨论 | 第25-29页 |
2.2.1 突变体基因序列的鉴定 | 第25-27页 |
2.2.2 蛋白分子量检测 | 第27页 |
2.2.3 紫外-可见光谱测定 | 第27-29页 |
2.2.4 蛋白功能活性测定 | 第29页 |
2.3 本章小结 | 第29-31页 |
第三章 D97N突变对aR4光循环的影响 | 第31-50页 |
3.1 样品准备 | 第31-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-35页 |
3.2.1 光循环中间态测定 | 第33页 |
3.2.2 固体核磁共振 | 第33-34页 |
3.2.3 D85/D86的pKa滴定 | 第34-35页 |
3.2.4 傅里叶红外光谱 | 第35页 |
3.3 结果与讨论 | 第35-49页 |
3.3.1 光循环中间态测定 | 第35-39页 |
3.3.2 D97突变对视黄醛结合口袋的影响 | 第39-42页 |
3.3.3 D97突变对质子受体D86的影响 | 第42-44页 |
3.3.4 D97突变对蛋白构象的影响 | 第44-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-50页 |
第四章 D97N突变对aR4三聚结构和能量转换效率的影响 | 第50-55页 |
4.1 样品准备 | 第50页 |
4.2 实验方法 | 第50-51页 |
4.2.1 蛋白聚集状态测定 | 第50页 |
4.2.2 ATP生成率的测定 | 第50-51页 |
4.3 结果与讨论 | 第51-53页 |
4.3.1 蛋白聚集状态测定 | 第51-52页 |
4.3.2 菌株ATP生成率的测定 | 第52-53页 |
4.4 本章小结 | 第53-55页 |
第五章 总结与展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
硕士期间发表论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |