| 中文摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 结直肠癌概述 | 第9页 |
| 1.2 结直肠癌的发病机制 | 第9-10页 |
| 1.3 结直肠癌的环境因素 | 第10-11页 |
| 1.4 遗传标志性位点在结直肠癌研究中的重要性 | 第11页 |
| 1.5 外显子测序在结直肠癌研究中的应用 | 第11-12页 |
| 1.6 候选基因概述及实验设计思路 | 第12-16页 |
| 1.7 实验研究内容及意义 | 第16-18页 |
| 第二章 DDI2蛋白表达验证实验 | 第18-36页 |
| 2.1 试剂及仪器 | 第18-21页 |
| 2.1.1 样本及质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 常用溶液配制 | 第19-21页 |
| 2.2 步骤及方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第21-23页 |
| 2.2.2 细胞总蛋白提取及测定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 Western Blot | 第25-27页 |
| 2.2.4 免疫组织化学染色 | 第27-29页 |
| 2.2.5 裸鼠体外成瘤实验 | 第29-30页 |
| 2.3 结果及讨论 | 第30-36页 |
| 2.3.1 DD12在结直肠癌细胞系中的蛋白表达结果 | 第30页 |
| 2.3.2 DD12在人结直肠癌组织中的蛋白表达结果 | 第30-31页 |
| 2.3.3 DD12在裸鼠体内对结直肠癌细胞成瘤能力的影响 | 第31-34页 |
| 2.3.4 讨论与总结 | 第34-36页 |
| 第三章 STX1A基因载体的构建 | 第36-50页 |
| 3.1 试剂及仪器 | 第36-38页 |
| 3.1.1 试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 仪器 | 第36-37页 |
| 3.1.3 主要溶液配制 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法及步骤 | 第38-47页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第38-39页 |
| 3.2.2 PCR过程 | 第39页 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶分离目的基因产物 | 第39-41页 |
| 3.2.4 琼脂糖凝胶回收 | 第41-42页 |
| 3.2.5 pMD18-T克隆载体与STX1A基因片段重组载体的构建 | 第42-45页 |
| 3.2.6 带有C-Myc标签的STXI4基因表达载体构建 | 第45-47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 DDI2与STX1A相互结合作用的初步探索 | 第50-61页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 4.1.1 细胞系及质粒 | 第50页 |
| 4.1.2 试剂 | 第50页 |
| 4.1.3 仪器 | 第50页 |
| 4.1.4 主要溶液配制 | 第50-51页 |
| 4.2 实验步骤与方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 CDI2与STX1A在结直肠癌细胞系中的mRNA表达 | 第51-54页 |
| 4.2.2 免疫共沉淀 | 第54-55页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第55-61页 |
| 4.3.1 DDI2与STX1A在结直肠癌细胞系中的mRNA表达情况 | 第55-57页 |
| 4.3.2 免疫共沉淀结果 | 第57-58页 |
| 4.3.3 讨论与总结 | 第58-61页 |
| 总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
