| 前言 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第15-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-37页 |
| 1.1 IGF2基因及表达调控 | 第18-23页 |
| 1.1.1 IGF家族 | 第18-19页 |
| 1.1.2 IGF2基因结构 | 第19-20页 |
| 1.1.3 IGF2基因表达调控 | 第20-23页 |
| 1.2 IGF2的生理功能 | 第23-24页 |
| 1.2.1 IGF2参与细胞生长与分化 | 第23-24页 |
| 1.2.2 IGF2与血管生成密切相关 | 第24页 |
| 1.3 IGF2与疾病 | 第24-32页 |
| 1.3.1 IGF2与生长障碍 | 第25-26页 |
| 1.3.2 IGF2与心血管疾病 | 第26-27页 |
| 1.3.3 IGF2与肿瘤 | 第27-32页 |
| 1.4 立题依据—IGF2在肿瘤干性细胞中印记丢失及调控的研究意义 | 第32-35页 |
| 1.5 研究路线 | 第35-37页 |
| 第2章 材料与方法 | 第37-55页 |
| 2.1 实验试剂与设备 | 第37-39页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.2 主要器材 | 第38-39页 |
| 2.2 主要仪器 | 第39页 |
| 2.3 细胞 | 第39-40页 |
| 2.4 主要实验材料和方法 | 第40-55页 |
| 2.4.1 细胞系及培养 | 第40页 |
| 2.4.2 流式细胞分选法分离CSCs | 第40-41页 |
| 2.4.3 流式细胞术检测CD133+表达 | 第41页 |
| 2.4.4 肿瘤干细胞成球培养 | 第41页 |
| 2.4.5 免疫荧光分析 | 第41-42页 |
| 2.4.6 DNA的提取 | 第42页 |
| 2.4.7 总RNA提取 | 第42-43页 |
| 2.4.8 RNA内残留DNA的处理 | 第43页 |
| 2.4.9 逆转录合成c DNA | 第43-44页 |
| 2.4.10 IGF2印记表达分析 | 第44-45页 |
| 2.4.11 染色质构象捕获法 | 第45-47页 |
| 2.4.12 Real-time PCR | 第47-49页 |
| 2.4.13 染色质免疫共沉淀实验 | 第49-50页 |
| 2.4.14 Western印记杂交 | 第50-51页 |
| 2.4.15 软琼脂克隆形成实验 | 第51-52页 |
| 2.4.16 化疗敏感性实验 | 第52页 |
| 2.4.17 放疗抵抗实验 | 第52页 |
| 2.4.18 小RNA干扰瞬时干涉实验 | 第52-53页 |
| 2.4.19 细胞周期检测 | 第53-54页 |
| 2.4.20 细胞凋亡检测 | 第54页 |
| 2.4.21 侵袭试验 | 第54页 |
| 2.4.22 迁移试验 | 第54页 |
| 2.4.23 统计分析 | 第54-55页 |
| 第3章 研究结果 | 第55-77页 |
| 3.1 肿瘤干细胞的分离及特性 | 第55-59页 |
| 3.1.1 肿瘤干细胞的分离及成球培养 | 第55页 |
| 3.1.2 细胞成球实验 | 第55-56页 |
| 3.1.3 CSC标志CD133的表达检测 | 第56-57页 |
| 3.1.4 CSC标志ALDH的表达检测 | 第57-58页 |
| 3.1.5 分选前后CD133阳性细胞的流式检测 | 第58-59页 |
| 3.2 肿瘤干细胞IGF2印记丢失 | 第59-62页 |
| 3.3 染色质构象捕获 | 第62-64页 |
| 3.4 肿瘤干细胞中IGF2的表达上调 | 第64-66页 |
| 3.4.1 CSCs中IGF2基因水平表达上调 | 第64-65页 |
| 3.4.2 CSCs中IGF2蛋白水平表达上调 | 第65-66页 |
| 3.5 肿瘤干细胞的克隆形成能力增强 | 第66-68页 |
| 3.6 IGF2表达上调的肿瘤干细胞存在放化疗抵抗 | 第68-69页 |
| 3.6.1 IGF2表达上调的CSCs存在化疗抵抗 | 第68页 |
| 3.6.2 IGF2表达上调的CSCs存在放疗抵抗 | 第68-69页 |
| 3.7 IGF2在维持肿瘤干细胞特性中发挥重要作用 | 第69-77页 |
| 3.7.1 两条针对IGF2干涉序列的干涉效果 | 第69-70页 |
| 3.7.2 干涉IGF2后对CSCs干细胞标志表达的影响 | 第70-71页 |
| 3.7.3 干涉IGF2后对CSCs细胞增殖的影响 | 第71页 |
| 3.7.4 干涉IGF2后对CSCs细胞周期的影响 | 第71-72页 |
| 3.7.5 干涉IGF2后对CSCs细胞凋亡的影响 | 第72-73页 |
| 3.7.6 干涉IGF2后对CSCs细胞迁移能力的影响 | 第73页 |
| 3.7.7 干涉IGF2后对CSCs细胞侵袭能力的影响 | 第73-74页 |
| 3.7.8 干涉IGF2后对CSCs细胞化疗敏感性的影响 | 第74页 |
| 3.7.9 干涉IGF2后对CSCs细胞放疗敏感性的影响 | 第74-77页 |
| 第4章 讨论 | 第77-83页 |
| 4.1 肿瘤干细胞中存在IGF2印记丢失 | 第77-78页 |
| 4.2 肿瘤干细胞中IGF2印记丢失与IGF2表达上调相关 | 第78-79页 |
| 4.3 IGF2表达上调促进肿瘤干细胞自我更新及放化疗抵抗 | 第79页 |
| 4.4 IGF2在维持肿瘤干细胞特性中发挥重要作用 | 第79-80页 |
| 4.5 IGF2印记丢失机制的研究 | 第80-81页 |
| 4.6 IGF2印记丢失可以作为鉴别肿瘤干细胞的特征 | 第81-82页 |
| 4.7 IGF2印记丢失具有潜在临床应用前景 | 第82-83页 |
| 第5章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
