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药物成瘾候选基因的DNA甲基化研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
引言第10-12页
1 目的第12页
2 实验材料与方法第12-25页
   ·实验仪器第12页
   ·主要试剂第12-14页
     ·部分试剂配制第13-14页
   ·人群样本的甲基化水平测定第14-18页
     ·候选基因的挑选第14页
     ·引物设计第14页
     ·实验对象第14-15页
     ·外周血全基因组DNA的提取第15-16页
     ·亚硫酸氢盐处理第16页
     ·PCR反应第16-17页
     ·焦磷酸测序第17-18页
   ·重组质粒的构建第18-22页
     ·引物设计第18-19页
     ·目标片段的PCR扩增第19-20页
     ·pGL3质粒提取第20页
     ·PCR片段和pGL3粘性末端的获得第20-21页
     ·PCR片段和pGL3连接第21-22页
     ·转化产物的鉴定第22页
   ·293细胞培养和重组质粒转染第22-24页
     ·293细胞复苏第22页
     ·细胞传代第22-23页
     ·细胞冻存第23页
     ·提取去内毒素的重组质粒第23页
     ·细胞种板和脂质体转染第23页
     ·脂质体转染第23-24页
     ·双荧光素酶报告系统检测第24页
     ·5’AZA处理第24页
   ·数据统计分析第24-25页
3 结果第25-39页
   ·临床资料比较和各基因检测的CpG位点信息第25-27页
   ·药物成瘾组与健康对照组甲基化水平比较第27-30页
   ·海洛因组和甲基苯丙胺组甲基化水平比较和POMS评分关联性分析第30-33页
   ·重组质粒的构建第33-36页
   ·检测目的片段对基因表达的影响第36-37页
   ·5’AZA对检测目的片段基因表达的影响第37-39页
4 讨论第39-42页
参考文献第42-46页
附录A 部分中英文对照表第46-47页
附录B 综述第47-66页
 参考文献第58-66页
在学研究成果第66-67页
致谢第67页

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