| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 植物MYB转录因子研究进展 | 第14-19页 |
| ·植物MYB转录因子的结构与分类 | 第14-15页 |
| ·植物MYB转录因子的进化 | 第15-16页 |
| ·植物MYB转录因子的功能 | 第16-19页 |
| ·参与植物的生物和非生物胁迫 | 第16-18页 |
| ·参与对植物激素的应答 | 第18页 |
| ·调控植物的初生和次生产物的代谢 | 第18-19页 |
| 2 硫苷研究进展 | 第19-23页 |
| ·硫苷的结构与分类 | 第19-20页 |
| ·硫苷合成调控关键基因 | 第20-22页 |
| ·硫苷的功能 | 第22-23页 |
| ·重要的风味物质 | 第22页 |
| ·参与植物防御 | 第22页 |
| ·药用价值 | 第22-23页 |
| 3 本研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 萝卜MYB转录因子基因克隆与序列分析 | 第24-42页 |
| 1 材料与方法 | 第24-28页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·质粒与菌株 | 第24页 |
| ·所需试剂 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25页 |
| ·RNA检测 | 第25页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第25-26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·基因组步移文库构建 | 第26-27页 |
| ·目的片段PCR扩展 | 第27页 |
| ·目的片段的回收与转化 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-40页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因DNA与cDNA的扩增结果 | 第28-29页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因克隆及序列分析 | 第29-36页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因启动子序列克隆 | 第36页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因启动子元件预测分析 | 第36-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因序列分析 | 第40页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因启动子元件分析 | 第40-42页 |
| 第三章 萝卜MYB转录因子表达特性分析 | 第42-52页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·基因DNA及RNA提取 | 第43页 |
| ·载体的构建 | 第43-45页 |
| ·转化农杆菌 | 第45页 |
| ·硫苷合成代谢过程中相关基因qRT-PCR分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因在不同器官和生长时期的表达 | 第45页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因在不同处理下的表达 | 第45-48页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29过表达载体构建和转化农杆菌 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因在不同生长时期和部位的表达水品基本一致 | 第49页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因对不同处理的反应差异较大 | 第49-52页 |
| 第四章 萝卜MYB转录因子基因转录激活功能的验证及定位分析 | 第52-64页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·试剂及菌株 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-55页 |
| ·载体的构建 | 第52-54页 |
| ·酵母热激转化 | 第54页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第54-55页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-62页 |
| ·酵母转化中融合表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·重组质粒pGBKT7-RsMYB28和pGBKT7-RsMYB29的构建 | 第55-57页 |
| ·重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第57页 |
| ·重组质粒的酵母转化分析 | 第57-59页 |
| ·细胞定位分析中融合表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·细胞定位分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因转录激活活性分析 | 第62页 |
| ·RsMYB28和RsMYB29基因亚细胞定位分析 | 第62-64页 |
| 全文结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
