| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-33页 |
| ·我国养鹅业现状及常见病 | 第14-15页 |
| ·我国养鹅业现状 | 第14页 |
| ·我国养鹅业常见病 | 第14-15页 |
| ·小鹅瘟研究现状 | 第15-29页 |
| ·小鹅瘟简介 | 第15-17页 |
| ·小鹅瘟病原 | 第17-20页 |
| ·小鹅瘟的实验室诊断 | 第20-24页 |
| ·小鹅瘟生物制品 | 第24-29页 |
| ·原核表达系统在亚单位疫苗中的应用 | 第29-31页 |
| ·原核表达技术的应用 | 第29-30页 |
| ·原核表达外源蛋白的优点 | 第30页 |
| ·小鹅瘟的原核表达研究 | 第30-31页 |
| ·研究的目的和意义 | 第31页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第31-33页 |
| ·研究内容 | 第31-32页 |
| ·研究技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 小鹅瘟病毒BZ株的分离鉴定 | 第33-43页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·病料及抗体 | 第33页 |
| ·试验动物及鹅胚 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·试剂及配制 | 第34页 |
| ·引物 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·病料的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·病毒的分离培养 | 第35页 |
| ·病毒培养特性的研究 | 第35页 |
| ·对3日龄雏鹅的毒力试验 | 第35页 |
| ·卵黄抗体的保护试验 | 第35-36页 |
| ·GPV VP3全基因克隆及产物回收 | 第36页 |
| ·同源性分析 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·病料的PCR检测 | 第37页 |
| ·病毒的分离培养 | 第37页 |
| ·病毒培养特性的研究 | 第37-38页 |
| ·对3日龄雏鹅的毒力试验 | 第38-39页 |
| ·卵黄抗体保护试验 | 第39页 |
| ·GPV VP3全基因克隆及同源性分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 小鹅瘟病毒结构蛋白VP3优势抗原表位区的表达及免疫原性研究 | 第43-55页 |
| ·前言 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·载体、菌株及相关试剂 | 第44页 |
| ·试验动物 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·抗原表位富集区的预测及引物设计 | 第44页 |
| ·目的片段的获得 | 第44-45页 |
| ·DH5a转化用感受态菌株的制备 | 第45页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第45-47页 |
| ·蛋白的表达及可溶性分析 | 第47-48页 |
| ·蛋白的免疫原性研究 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-53页 |
| ·抗原表位富集区的筛选及引物设计 | 第48-49页 |
| ·目的片段的获得 | 第49页 |
| ·感受态制备 | 第49页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的表达及可溶性分析 | 第50-51页 |
| ·蛋白的免疫原性研究 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 小鹅瘟VP3-2蛋白大规模高效表达研究 | 第55-64页 |
| ·前言 | 第55页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·药品与试剂 | 第55-56页 |
| ·仪器 | 第56页 |
| ·方法 | 第56页 |
| ·菌种的制备 | 第56页 |
| ·溶氧(DO)的控制策略 | 第56页 |
| ·数据处理 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-61页 |
| ·溶氧水平对融合蛋白VP3-2蛋白的高密度发酵影响 | 第56-59页 |
| ·分阶段溶氧控制溶氧对生产VP3-2蛋白的影响 | 第59-61页 |
| ·DO反馈补料策略在VP3-2蛋白生产中的应用 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第五章 小鹅瘟亚单位疫苗抗原的制备及质量检测 | 第64-77页 |
| ·前言 | 第64页 |
| ·材料 | 第64-67页 |
| ·预处理蛋白 | 第64页 |
| ·化学试剂、培养基及标准品 | 第64-65页 |
| ·仪器设备 | 第65页 |
| ·主要溶液的配制 | 第65-67页 |
| ·方法 | 第67-69页 |
| ·发酵罐表达蛋白可溶性分析 | 第67-68页 |
| ·蛋白破碎缓冲液的选择 | 第68页 |
| ·蛋白复性工艺的优化 | 第68页 |
| ·制备的小鹅瘟亚单位疫苗抗原的质量检验 | 第68-69页 |
| ·结果 | 第69-75页 |
| ·发酵罐表达重组蛋白可溶性分析 | 第69-70页 |
| ·蛋白破碎缓冲液的选择及破碎效果镜检 | 第70-71页 |
| ·蛋白复性工艺的优化 | 第71-72页 |
| ·蛋白复性后处理及电镜观察 | 第72-73页 |
| ·制备的小鹅瘟亚单位疫苗抗原的质量检验 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 第六章 小鹅瘟病毒结构蛋白VP3亚单位疫苗的制备及检验 | 第77-87页 |
| ·前言 | 第77页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·菌株和佐剂 | 第77页 |
| ·试验动物 | 第77页 |
| ·培养基 | 第77-78页 |
| ·其他缓冲液及试剂 | 第78页 |
| ·主要仪器 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-81页 |
| ·蜂胶疫苗的制备 | 第78-79页 |
| ·疫苗的检验 | 第79-81页 |
| ·结果 | 第81-85页 |
| ·抗原制备 | 第81页 |
| ·三批疫苗的物理性状检验 | 第81页 |
| ·三批疫苗的无菌检验 | 第81页 |
| ·最小免疫剂量的确定 | 第81-82页 |
| ·三批疫苗的安全性检验 | 第82-83页 |
| ·疫苗的效力检验 | 第83页 |
| ·抗体持续期 | 第83-85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第七章 结论 | 第87-88页 |
| 第八章 创新点 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 个人简介 | 第100-102页 |
| 附录 | 第102页 |
