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四种猪病原菌PCR诊断方法的建立与应用

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略词表第12-14页
第一章APP分型方法的建立与应用第14-35页
 1 APP的概述第14-23页
   ·APP的病原学特性第14页
   ·APP的流行病学第14-15页
   ·APP的临床症状及其病理变化第15页
   ·APP的致病因子第15-18页
     ·外毒素第15-16页
     ·脂多糖第16-17页
     ·荚膜多糖第17页
     ·外膜蛋白第17页
     ·转铁结合蛋白第17-18页
   ·APP的分型方法第18-23页
     ·APP的血清学分型方法第18-20页
       ·补体结合试验(CFT)第18-19页
       ·间接血凝试验(IHA)第19页
       ·乳胶凝集试验(LAT)第19页
       ·琼脂扩散试验(GDT)第19页
       ·酶联免疫吸附测定(ELISA)第19-20页
       ·其他血清学鉴定方法第20页
     ·APP的基因分型方法第20-23页
       ·随机引物PCR(AP-PCR)第20页
       ·结构基因的差异第20页
       ·限制性片段多态性分析(RFLP)第20-21页
       ·DNA指纹图谱第21页
       ·PCR和复合PCR第21-22页
       ·基因芯片第22-23页
 2 研究目的与意义第23页
 3 材料与方法第23-28页
   ·材料第23-26页
     ·标准菌株第23页
     ·临床分离菌株第23页
     ·主要试剂和药品第23-24页
     ·实验器材第24页
     ·培养基及试剂的配制第24-25页
     ·试验动物第25页
     ·引物的设计与合成第25-26页
   ·方法第26-28页
     ·免疫原和检测抗原的制备第26页
     ·APP标准阳性血清的制备及其效价的检测第26-27页
     ·PCR分型模板的制备第27页
     ·APP复合PCR分型方法的反应体系第27-28页
     ·复合PCR鉴定临床分离的APP菌株第28页
 4 结果与分析第28-32页
   ·APP生物I型菌株标准阳性血清效价的GDT测定第28-30页
   ·APP复合PCR分型的结果第30-32页
   ·复合PCR鉴定临床分离的APP菌株第32页
 5 讨论第32-34页
 6 结论第34-35页
第二章HPS、SS、Pm、APP复合PCR检测方法的建立与应用第35-53页
 1 PRDC病原种类研究进展第35-40页
   ·HPS概述第36-37页
     ·HPS病原学特性第36页
     ·HPS的流行病学第36页
     ·HPS的临床症状及其病理变化第36页
     ·HPS的致病因子第36-37页
   ·Pm的概述第37-38页
     ·Pm的病原学第37页
     ·Pm的流行病学第37页
     ·Pm的临床症状和病理变化第37页
     ·Pm的致病因子第37-38页
   ·SS的概述第38-39页
     ·SS的病原学第38页
     ·SS的流行病学第38页
     ·SS的临床症状与病理变化第38-39页
     ·SS的致病因子第39页
   ·四种病原菌诊断方法的研究第39-40页
 2 研究目的与意义第40页
 3 材料与方法第40-44页
   ·材料第40-41页
     ·标准菌株第40页
     ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR引物的设计与合成第40-41页
   ·方法第41-44页
     ·APP单一PCR方法的建立与优化第41-43页
       ·APP单一PCR退火温度的优化第41-42页
       ·APP单一PCR rTaq酶的优化第42页
       ·APP单一PCR最佳反应体系和条件的确定第42-43页
       ·APP单一PCR方法的敏感性试验第43页
       ·APP单一PCR方法的特异性试验第43页
     ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR检测方法的建立与优化第43-44页
       ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR最佳反应体系和反应条件的优化第43-44页
       ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的敏感性试验第44页
       ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的特异性试验第44页
       ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的重复性试验第44页
       ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的临床应用第44页
 4 结果与分析第44-51页
   ·APP单一PCR反应体系和条件的优化第44-45页
   ·APP单一PCR最佳体系和条件的确定第45-46页
   ·APP单一PCR的敏感性试验第46页
   ·APP单一PCR的特异性试验第46-47页
   ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR反应体系和条件的优化第47页
   ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR最佳反应体系和条件的确定第47-48页
   ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的敏感性试验第48页
   ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的特异性试验第48-49页
   ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的重复性试验第49-50页
   ·HPS、SS、Pm、APP复合PCR的临床应用第50-51页
 5 讨论第51-52页
 6 结论第52-53页
参考文献第53-60页
致谢第60页

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