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RNA干扰草莓DHAR基因的初步研究

摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-26页
   ·草莓转基因的研究现状第11-13页
     ·草莓抗病虫害转基因研究第11-12页
     ·草莓抗逆性转基因研究第12页
     ·抗除草剂转基因研究第12-13页
     ·草莓品质基因工程第13页
   ·草莓再生体系的研究第13-15页
     ·草莓花药培养的研究第13-14页
       ·草莓茎尖培养的研究第14页
       ·草莓离体叶片不定芽诱导的研究第14-15页
   ·植物抗坏血酸的研究进展第15-21页
     ·抗坏血酸的生理学功能第15-17页
     ·植物抗坏血酸的生物合成途径第17-19页
     ·植物抗坏血酸的代谢和转运第19页
     ·植物抗坏血酸的调控机制第19-21页
   ·植物脱氢抗坏血酸还原酶研究进展第21-22页
   ·RNA 干扰的研究进展第22-24页
     ·RNA 干扰的作用机理第22页
     ·RNAi 表现出的几个特征第22-23页
     ·RNAi 在改良植物品质的应用第23-24页
     ·RNAi 技术在植物功能基因组中的应用第24页
     ·RNAi 改良植物抗病性第24页
   ·本实验的研究意义和目的第24-25页
   ·技术路线第25-26页
2 材料和方法第26-35页
   ·实验材料第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·菌株与质粒第26页
     ·酶及生化试剂第26页
     ·主要仪器第26页
     ·药品及常用试剂的配制第26-27页
   ·试验内容和方法第27-35页
     ·果实发育过程中维生素 C 含量积累与脱氢抗坏血酸还原酶活性的研究第27-28页
     ·草莓果实脱氢抗坏血酸还原酶基因 DHAR 的克隆第28-30页
     ·RNAi 植物表达载体的构建第30-32页
     ·森嘎啦叶片再生体系的优化第32页
     ·转化体系的优化第32-33页
     ·转基因植株的 PCR 检测第33-35页
3 结果与分析第35-47页
   ·果实维生素 C 含量的测定与脱氢抗坏血酸还原酶活性的分析第35-36页
     ·不同品种草莓维生素 C 含量的变化第35页
     ·DHAR 的分析第35-36页
   ·草莓果实脱氢抗坏血酸还原酶基因 DHAR 的克隆第36-38页
     ·草莓果实总 RNA 的提取第36-37页
     ·RT-PCR 扩增 DHAR 基因片段第37-38页
   ·RNA 干扰植物表达载体的构建第38-42页
     ·pKANNIBAL- FR 的构建第38-41页
     ·Part27-i DHAR 载体的构建第41-42页
     ·转化农杆菌 EHA105第42页
   ·再生体系的优化第42-43页
     ·不同激素配比对不定芽分化的影响第42-43页
     ·暗培养对叶片不定芽诱导率的影响第43页
   ·转化体系的优化第43-45页
     ·卡那霉素筛选压力的确定第43-44页
     ·除菌剂浓度对遗传转化的影响第44页
     ·草莓的遗传转化第44-45页
   ·转基因植株的 PCR 检测第45-47页
4. 讨论第47-50页
   ·DHAR 在 AsA 积累中的作用第47页
   ·RNAi 技术第47-48页
   ·RNA 干扰效果的检测第48页
   ·草莓的再生及遗传转化体系优化第48-50页
5. 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-60页
附录第60-65页
图版说明第65-68页
攻读硕士学位期间发表的学术文章第68页

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