| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 论文正文 | 第14-46页 |
| 1 前言 | 第14-16页 |
| 2 材料、试剂与仪器 | 第16-20页 |
| ·质粒、菌株和细胞 | 第16页 |
| ·引物设计 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器设备 | 第17-18页 |
| ·常用试剂的配制 | 第18-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-31页 |
| ·从PCA13-TRAIL上切下目的基因TRAIL | 第20-22页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第20页 |
| ·转化 | 第20页 |
| ·质粒的提取和酶切鉴定 | 第20-22页 |
| ·真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL的构建 | 第22-23页 |
| ·载体PCDNA3.1(+)的酶切及片段回收 | 第22页 |
| ·连接反应 | 第22-23页 |
| ·连接反应产物的转化 | 第23页 |
| ·酶切鉴定 | 第23页 |
| ·PCDNA3.1(+)-TRAIL在食管癌细胞EC9706中的表达 | 第23-27页 |
| ·食管癌细胞EC9706的培养 | 第23页 |
| ·细胞的转染 | 第23-24页 |
| ·转染后细胞形态学观察 | 第24页 |
| ·RT-PCR方法鉴定PCDNA3.1(+)-TRAIL在食管癌细胞ECA9706中MRNA水平的表达 | 第24-26页 |
| ·免疫细胞化学方法鉴定PCDNA3.1(+)-TRAIL在食管癌细胞EC9706中蛋白水平的表达 | 第26-27页 |
| ·TRAIL对食管癌细胞EC9706产生的凋亡效应 | 第27-28页 |
| ·食管癌细胞EC9706的培养 | 第27页 |
| ·细胞的转染 | 第27页 |
| ·流式细胞技术检测细胞EC9706凋亡效率 | 第27-28页 |
| ·重组质粒TRAIL对耐药相关基因SIRT1产生的作用效应 | 第28-30页 |
| ·RT-PCR方法检测重组质粒TRAIL对SIRT1 MRNA表达水平的影响 | 第28-29页 |
| ·免疫细胞化学方法检测重组质粒TRAIL对SIRT1蛋白表达水平的影响 | 第29-30页 |
| ·统计学方法分析数据 | 第30-31页 |
| 4 实验结果 | 第31-40页 |
| ·原核质粒PCA13-TRAIL的鉴定 | 第31页 |
| ·真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL的构建 | 第31-32页 |
| ·重组真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL在食管癌细胞EC9706中的表达 | 第32-34页 |
| ·RT-PCR方法鉴定重组真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL在食管癌细胞中MRNA水平表达的结果 | 第32-33页 |
| ·免疫细胞化学方法鉴定重组真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL在食管癌细胞中蛋白水平表达的结果 | 第33-34页 |
| ·重组质粒PCDNA3.1(+)TRAIL对食管癌细胞EC9706产生的凋亡效应 | 第34-37页 |
| ·重组质粒PCDNA3.1(+)-TRAIL对耐药相关基因SIRT1产生的作用效应 | 第37-40页 |
| ·RT-PCR方法鉴定重组真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL对耐药相关基因SIRT1的MRNA表达水平作用效应的结果 | 第37-38页 |
| ·免疫细胞化学方法鉴定重组真核表达载体PCDNA3.1(+)-TRAIL对耐药相关基因SIRT1的蛋白表达水平作用效应的结果 | 第38-40页 |
| 5 讨论 | 第40-43页 |
| 6 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 第二章 综述 | 第46-65页 |
| 第一部分:TRAIL及其与肿瘤关系的研究进展 | 第46-58页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 第二部分:SIRT1及其与肿瘤关系的研究进展 | 第58-65页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第三章 附录 | 第65-66页 |
| 英文缩写词 | 第65-66页 |
| 个人简历 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
