英文缩略词 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第8-10页 |
第二章 实验材料与方法 | 第10-31页 |
一、材料 | 第10-16页 |
1.细胞株来源 | 第10页 |
2.质粒来源 | 第10页 |
3.主要仪器和设备 | 第10-12页 |
4.主要试剂 | 第12-14页 |
5.主要试剂的配制 | 第14-16页 |
二、实验方法 | 第16-31页 |
1.细胞培养 | 第16-17页 |
2.慢病毒包装 | 第17-18页 |
3. 慢病毒生物学滴度测定 | 第18页 |
4. 慢病毒感染 SGC7901 并构建稳转株 SGC7901-hOCT4 、稳转株SGC7901-ZPP | 第18-19页 |
5.半定量 RT-PCR 鉴定稳转细胞株 SGC7901-hOCT416 | 第19-21页 |
6.MTS 实验检测细胞增殖能力 | 第21-22页 |
7.细胞划痕实验 | 第22页 |
8. 胃癌细胞的侵袭性实验 | 第22-23页 |
9. 胃癌细胞的迁移实验 | 第23页 |
10.荧光定量 PCR | 第23-26页 |
11.细胞免疫组化检测 OCT4、Sox2、β-catenin、Wnt3 在 SGC7901、稳转株 SGC7901-hOCT4、稳转株 SGC7901-ZPP 表达情况 | 第26-27页 |
12. Western Blot 实验 | 第27-29页 |
13.胃癌细胞的成瘤实验 | 第29-30页 |
14.统计学方法 | 第30-31页 |
第三章 .实验结果及分析 | 第31-43页 |
一、慢病毒包装及滴度测定结果 | 第31页 |
二、慢病毒转染 SGC7901、感染效率的评价及构建稳转细胞稳转株SGC7901-hOCT4、稳转株 SGC7901-ZPP | 第31-34页 |
三、MTS 检测过表达 OCT4 对胃癌细胞的增殖影响 | 第34-35页 |
四、Transwell 细胞侵袭实验 | 第35页 |
五、Transwell 细胞迁移实验 | 第35-36页 |
六、细胞划痕实验 | 第36-37页 |
七、荧光定量 PCR | 第37-39页 |
八、细胞形态观察 | 第39-40页 |
九、细胞免疫组化检测过表达 OCT4 的胃癌细胞 7901 中 Sox2、β-catenin、Wnt3 表达情况 | 第40-41页 |
十、Western Bolt 结果 | 第41页 |
十一、胃癌细胞的裸鼠成瘤实验 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
第五章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
综述 | 第52-65页 |
参考文献 | 第62-65页 |