| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 论文中重要的缩略词 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-23页 |
| ·内毒素(endotoxins,ET)概述 | 第9-10页 |
| ·内毒素的检测 | 第10-11页 |
| ·家兔热原实验法(Rabbit Pyrogenic Test,RT) | 第10-11页 |
| ·鲎实验法(Limulus Test,LT) | 第11页 |
| ·其它检测方法 | 第11页 |
| ·内毒素的去除方法 | 第11-14页 |
| ·超滤法和荷电微孔滤膜法 | 第12页 |
| ·石棉及活性炭吸附法 | 第12页 |
| ·化学降解法 | 第12页 |
| ·相分离法 | 第12-13页 |
| ·离子交换色谱法 | 第13页 |
| ·亲和色谱法 | 第13-14页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯(PHA)概述 | 第14-17页 |
| ·PHA的单体组成和分类 | 第15页 |
| ·PHA的生理功能 | 第15-16页 |
| ·PHA的材料学性质 | 第16-17页 |
| ·PHA的应用 | 第17页 |
| ·PHA的生物合成途径 | 第17-18页 |
| ·乙酰辅酶A直接合成PHB途径 | 第17-18页 |
| ·脂肪酸从头合成途径 | 第18页 |
| ·脂肪酸β-氧化途径 | 第18页 |
| ·PHA代谢相关的酶和蛋白质 | 第18-20页 |
| ·PHA聚合酶(PhaC) | 第18-19页 |
| ·PHA颗粒结合蛋白(PhaP) | 第19页 |
| ·乙酰乙酰辅酶A还原酶(PhaB) | 第19-20页 |
| ·(R)-3-羟基脂酰-ACP:CoA酰基转移酶(PhaG) | 第20页 |
| ·R-特异的烯脂酰辅酶A水合酶(PhaJ) | 第20页 |
| ·PHA解聚酶(depolymerase, PhaZ) | 第20页 |
| ·脂多糖结合蛋白简介 | 第20-21页 |
| ·前景展望 | 第21页 |
| ·论文的目的及其意义 | 第21-23页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第23-41页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·菌种和质粒 | 第23页 |
| ·分子生物学常用的工具酶和试剂盒 | 第23-24页 |
| ·常用生化试剂 | 第24-25页 |
| ·分子量标准物 | 第25-26页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)用试剂 | 第26页 |
| ·仪器和设备 | 第26-27页 |
| ·常规实验方法 | 第27-33页 |
| ·菌种保存方法 | 第27-28页 |
| ·常用培养基的配制 | 第28-29页 |
| ·常用溶液及缓冲液的配制 | 第29页 |
| ·分子生物学常规操作 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第30页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第30-31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第31-33页 |
| ·溶液中内毒素去除研究方法 | 第33-41页 |
| ·PHB纳米颗粒的制作 | 第33-34页 |
| ·酵母表达质粒pGAPHLBP的构建 | 第34-36页 |
| ·PCR和酶切验证表达载体构建 | 第36页 |
| ·Pichia Pastoris GS115 的转化及重组子筛选 | 第36-38页 |
| ·Western blot分析酵母重组菌中目的蛋白的表达 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白和PHB颗粒结合构建的亲和粒子与内毒素的结合 | 第39页 |
| ·蛋白质溶液中内毒素的去除效率和目的产物的回收率 | 第39-41页 |
| 第3章 结果与分析 | 第41-52页 |
| ·融合蛋白和PHB颗粒结合构建的亲和粒子与内毒素的结合 | 第42-43页 |
| ·酵母表达质粒pGAPHLBP的构建和验证 | 第43-44页 |
| ·Pichia Pastoris GS115 的转化及重组子筛选 | 第44-47页 |
| ·毕赤酵母重组子的筛选 | 第45-46页 |
| ·Western blot分析酵母重组菌中目的蛋白的表达 | 第46-47页 |
| ·蛋白质溶液中内毒素的去除效率和目的产物的回收率 | 第47-52页 |
| 第4章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第63页 |